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目的:
S期激酶相关蛋白2(Skp2)是细胞周期相关蛋白,在很多肿瘤中都高表达,且和预后呈负相关,但是在鼻咽癌中研究甚少,仅有一篇来自台湾Fang的报道。台湾地区的结果不一定适用于我们鼻咽癌高发区,加之Fang未在细胞系中进行机理研究,所以,本研究旨在明确Skp2在鼻咽癌中的临床意义,尤其是和预后的相关性;并且探索Skp2影响鼻咽癌预后的作用机制,主要从对放疗和化疗敏感性影响的角度进行研究,以期指导鼻咽癌的个体化治疗。
方法:
利用组织芯片进行免疫组织化学染色,检测Skp2蛋白在鼻咽癌组织中的表达情况,结合临床病理及随访资料分析Skp2与鼻咽癌临床病理特征、总生存时间及无瘤生存时间等的相关性。利用RNA干扰的方法下调鼻咽癌细胞株CNE1及CNE2中Skp2表达后,用PI染色流式细胞仪检测细胞周期分布的改变,用克隆形成实验检测细胞对高能X线放射敏感性的变化,用MTT法检测细胞对顺铂化疗敏感性的变化。
结果:
127例鼻咽癌组织中75.6%的患者Skp2表达阳性;Skp2表达阳性与鼻咽癌患者临床病理特征均没有相关性,但是Skp2表达阳性的患者较阴性患者总生存时间短(p=0.013),无瘤生存时间也较短(p=0.012);在多因素分析中,Skp2阳性是总生存和无瘤生存的独立预后因子(总生存p=0.009,风险比4.06;无瘤生存p=0.008,风险比3.56);同时,临床分期为Ⅲ-Ⅳ期(总生存p=0.012,风险比3.20;无瘤生存p=0.002,风险比1.94)和性别为女性(总生存p=0.016,风险比0.31;无瘤生存p=0.006,风险比0.27)也是影响总生存和无瘤生存时间的独立因素。
采用RNA干扰技术能够明显下调鼻咽癌细胞株CNE1及CNE2的Skp2蛋白表达水平。下调Skp2表达后,鼻咽癌细胞周期分布发生改变,G1期比例增加,S期比例减少;下调Skp2表达后,鼻咽癌细胞经不同剂量高能X线照射后的存活分数较对照组均有降低的趋势,放射敏感性呈增加趋势;下调Skp2表达后,鼻咽癌细胞对顺铂化疗的IC50值增加,化疗敏感性降低。
结论:
Skp2与鼻咽癌的预后呈负相关,是总生存及无瘤生存的独立预后因子。Skp2可能通过增加鼻咽癌细胞的辐射抗性影响鼻咽癌的预后。