本文通过观察NF-κB抑制剂-二硫代氨基甲酸吡咯烷(pyrrodlidinedithiocarbamate，PDTC)对TGF-β1诱导的肺成纤维细胞表达CTGF、α-SMA的影响，探讨NF-κB在TGF-β1诱导肺成纤维细胞表达CTGF及肺成纤维细胞向MF分化中的作用。 研究方法： 1.实验动物和细胞来源选用170-200g雄性SD大鼠，一次性气管内滴注博莱霉素-A5(bleomycin-A5，BLM-A5，5mg/kg)，第14天取肺组织培养肺成纤维细胞，第4代细胞用于实验。 2.细胞培养采用组织块法培养肺成纤维细胞，37℃，浓度5％的CO2，含10％小牛血清的RPMI1640培养基条件下培养。 3.MTT法选择TGF-β1和PDTC的适宜浓度将细胞悬液(细胞浓度为2×105个/ml)接种于96孔板中，培养24小时后，分别加入不同浓度的TGF-β1(1、10、20ng/ml)和PDTC(20、100、500uM)，培养24小时后测定细胞MTT活力，根据MTT结果及参考文献选择TGF-β1和PDTC的适宜浓度。 4.CTGF和α-SMA的细胞免疫化学染色将细胞悬液接种于24孔板中，细胞浓度为2×105/ml，每孔加液1ml，进行细胞爬片。实验分别分为以下几组：sham组，TGF-β1组(浓度为10ng/ml)，PDTC+TGF-β1组(PDTC浓度为500uM，TGF-β1浓度为10ng/ml)，PDTC组(浓度为500uM)，各组药物作用24小时。采用细胞免疫化学染色技术，观察CTGF和α-SMA阳性细胞。 5.流式细胞仪检测肺成纤维细胞表达α-SMA 6.统计学分析数据均用均数±标准差((x)±SD)表示，采用SPSS-11.5统计软件包，多个样本均数比较用单因素方差分析(One-WayANOVA)，多个样本均数间的两两比较用最小显著差法(leastsignificantdifference，LSD)，P＜0.05作为判断有显著性差异的标准。 研究结果： 1.MTT结果。浓度为1、10、20ng/ml的TGF-β1的MTT活力和浓度为20、100、500uM的PDTC的MTT活力与sham组比较没有统计学差异(P＞0.05)，对肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞的活性均没有影响。 2.肺成纤维细胞表达CTGF的免疫化学染色结果。TGF-β1诱导肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞表达CTGF，CTGF染色阳性细胞百分率(51.93±4.93％)和平均光密度值(0.413±0.016)与sham组(29.49±2.28％)(0.312±0.017)比较，明显增加(P＜0.05)。PDTC+TGF-β1组的CTGF免疫染色阳性细胞百分率(30.36±2.66％)与TGF-β1组比较，明显减少(P＜0.05)。单独应用PDTC，不能抑制肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞表达CTGF，PDTC组CTGF免疫染色阳性细胞百分率(30.97±2.55％)与sham组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。 3.肺成纤维细胞表达α-SMA的免疫化学染色结果。TGF-β1诱导肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞表达α-SMA的阳性细胞百分率(44.71±2.57％)与sham组(31.6±2.10％)比较，明显增加(P＜0.05)。PDTC明显抑制了TGF-β1诱导的肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞表达α-SMA，PDTC+TGF-β1组的α-SMA免疫染色阳性细胞百分率(27.10±2.74％)与TGF-β1组比较，明显减少(P＜0.05)。单独应用PDTC，不能抑制成纤维细胞表达α-SMA，PDTC组α-SMA免疫染色阳性细胞百分率(31.85±3.17％)与sham组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。 4.流式细胞仪检测成纤维细胞表达α-SMA的结果。TGF-β1组肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞表达α-SMA的X-Mode(42.45±2.75)与sham组(32.9±1.21)比较，明显增加(P＜0.05)。PDTC+TGF-β1的X-Mode(26.35±7.28)和TGF-β1比较，明显减少(P＜0.05)。单独应用PDTC(30.67±3.04)，与sham组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。 研究结论： 1.TGF-β1诱导肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞表达CTGF，诱导肺成纤维细胞向肌成纤维细胞分化。 2.PDTC抑制肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞表达CTGF，减少肺成纤维细胞向肌成纤维细胞分化。提示NF-κB促进TGF-β1诱导肺成纤维细胞表达CTGF及肺成纤维细胞分化。