目的:胶质母细胞瘤（Glioblastoma、GBM）是人类中枢神经系统肿瘤中高发病率和高侵袭性的恶性肿瘤。然而,胶质母细胞瘤的发生和发展的原因并不清楚。肿瘤的发生和发展是多基因参与、多步骤完成的复杂生命现象,其中包括多种转录因子对基因转录的调控作用,胶质母细胞瘤也不例外。FOXO家族成员含有一个结构上保守的序列。该序列能够靶定靶基因的DNA序列TTGTTTAC调整其转录。研究显示FOXO家族在基因的转录中起到了重要的作用从而介导细胞的多种过程,包括DNA损伤修复、凋亡、葡萄糖代谢、细胞周期和肿瘤形成。本课题重点研究FOXO家族中的FOXO1在胶质母细胞瘤的恶性行为中的作用及其分子机制。研究方法:1、本研究通过q RT-PCR和Western blot实验验证过表达及敲降质粒有效性;通过MTT、克隆形成实验和流式细胞术验证FOXO1对胶质母细胞瘤细胞的增殖和细胞周期进程的影响;通过裸鼠皮下成瘤实验、Western blot和免疫组织化学染色技术验证FOXO1在体内实验中对胶质母细胞瘤细胞的增殖和细胞周期进程的影响。2、本研究通过q RT-PCR和Western blot实验验证FOXO1对胶质母细胞瘤细胞的EMT进程的影响;通过Tranwell迁移实验验证FOXO1对胶质母细胞瘤细胞的迁移能力的影响。3、本研究通过q RT-PCR和Western blot实验验证FOXO1对衰老相关蛋白的影响;通过Ch IP检测FOXO1与SIRT1相互作用。4、本研究通过q RT-PCR和Western blot实验验证FOXO1在人胶质母细胞瘤细胞系和临床组织中的表达;通过免疫组织化学检测FOXO1在人胶质母细胞瘤临床组织中的表达。结果:1、FOXO1过表达及敲降质粒构建成功;过表达FOXO1抑制胶质母细胞瘤细胞的增殖能力和细胞周期进程;敲降FOXO1促进胶质母细胞瘤细胞的增殖能力和细胞周期进程;体内实验中,过表达FOXO1抑制裸鼠的皮下成瘤能力并抑制胶质母细胞瘤的周期进程;2、过表达FOXO1能够抑制胶质母细胞瘤的EMT进程和迁移能力;敲降FOXO1促进胶质母细胞瘤的EMT进程和迁移能力。3、FOXO1促进衰老相关蛋白SIRT1和p16INK4a表达;FOXO1与SIRT1之间存在负向的相互作用,FOXO1通过SIRT1促进肿瘤细胞的衰老。4、与正常人类星形胶质细胞相比,FOXO1在胶质母细胞瘤中表达降低。临床组织中,FOXO1在胶质母细胞瘤组织中表达以明显的幅度低于癌旁正常组织。结论:1、FOXO1通过抑制细胞周期进程抑制胶质母细胞瘤的增殖能力;2、FOXO1能够抑制胶质母细胞瘤的EMT过程和迁移能力;3、FOXO1通过抑制SIRT1转录促进胶质母细胞瘤细胞的衰老;4、与对照组相比,FOXO1在胶质母细胞瘤细胞和肿瘤组织中低表达。