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目的: 探讨尿道直肠瘘犬动物模型建立的最佳手术方法,在尿道直肠瘘犬动物模型成功建立的基础上分组治疗探讨尿道直肠瘘的治疗方案。 方法: 从2016年6月-2016年10月选取15只健康雄性杂种犬,年龄2-3岁,体质量12-15Kg。先随机抽取 5 只犬经肛门直肠拖出尿道膜部冷刀切开造模组,50mg/ml 舒泰50(Zoletil) (10mg/kg)静脉麻醉后,中心静脉导丝用无菌石蜡油充分润滑后插入尿道起指示作用,两把组织钳在尿道膜部同时固定中心静脉导丝、尿道、直肠组织,用手术刀纵行切开1.5cm左右的直肠尿道组织,可见中心静脉导丝;再随机抽取5只犬行经腹正中切口途径造模组,同样方法静脉麻醉后,中心静脉导丝在尿道内起指示作用,分离尿道腹侧周围组织,先用手术刀在尿道膜部腹侧纵行切开,抽出中心静脉导丝,两把组织钳固定和充分暴露尿道,然后纵行切开背侧尿道直到直肠,长约1.5cm;余5只犬行经肛门直肠括约肌切开造模,同样方法静脉麻醉后,逐步切开肛门内外括约肌,肛门内外括约肌分别用4号医用缝合线标记。中心静脉导丝起到识别尿道的作用,在尿道膜部纵行切开长约 1.5cm 的尿道直肠组织,可见中心静脉导丝。各组分别于术后4周、8周、12周行逆行尿道直肠造影、尿道内加压注入亚甲蓝观察直肠白色纱布蓝染情况和术后12周做瘘口病理组织学评价动物模型的制作效果。 从2016年11月-2017 年5月建模35只尿道直肠瘘犬动物模型随机分为7组,分别为Ⅰ期缝合尿道直肠+放置肛管组、Ⅰ期缝合尿道直肠组、Ⅰ期缝合尿道组、Ⅰ期缝合直肠组、Ⅱ期缝合尿道直肠+放置肛管组、Ⅱ期缝合尿道直肠组、对照组,每组5只犬。分别于术后4周、8周、12周经肛门直肠指诊判断各组实验犬的瘘口愈合情况,分别于术后4周、8周、12周经尿道逆行加压造影检查各组实验犬尿道狭窄情况。于实验开始后12周处死各组实验犬,切除瘘口及周围组织,进行瘢痕评分,采用多组独立样本比较的秩和检验(Kruskal-Wallis H 秩和检验)检测统计学意义,进一步多重比较采用Nemenyi 秩和检验;行HE和VG染色,观组织生长情况及胶原纤维生长情况。 结果: 1. 建立尿道直肠瘘犬动物模型术后 (1)经肛门直肠拖出冷刀切开组:实验犬术后12周无明显并发症出现;术后4周、8周、12周行逆行尿道直肠加压造影示尿道内存在线样高密度区,直肠内存在片状高密度区,尿道膜部和直肠之间存在线样高密度区;尿道内加压注入亚甲蓝可以观察到直肠内白色纱布蓝染 ,提示瘘口存在。病理组织学提示瘘口周围组织粘膜固有层紊乱,上皮的连续性破坏,存在大量炎症细胞,5只实验犬均造模成功(100%)。 (2)经腹正中切口组:1只实验犬术后一周自行咬开缝线死亡。1只实验犬术后4周在肛门左下方2cm处出现直径3cm左右的窦道,有粪尿混合物流出,尿道口无尿液流出,每天给予窦道周围碘伏消毒换药持续两周后窦道消失。余3只实验犬术后一周在刀口部位出现严重的感染,实验犬出现严重的排尿困难,给予静脉输液庆大霉素,刀口周围换药10天感染控制。术后4周、8周、12周逆行尿道直肠加压造影检查示瘘口存在,尿道内加压注入亚甲蓝可观察到直肠内白色纱布蓝染,造模成功(80%)。 (3)经肛门直肠括约肌途径切开组:5只实验犬术后4周、8周、12周行逆行尿道直肠加压造影检查示瘘口存在,尿道内加压注入亚甲蓝可观察到直肠内白色纱布蓝染,尿道直肠瘘造模成功(100%)。其中 1 只实验犬在术后2周排便时无下蹲和翘尾巴的动作,肛门周围出现稀糊样大便,提示大便失禁。 2.尿道直肠瘘分组治疗的结果 (1)瘘口愈合情况:分组治疗12周后,7组的瘘口愈合率差异具有统计学意义(??=17.858,P=0.003<0.05)。本研究中,成对比较结果显示Ⅰ期缝合尿道直肠+放置肛管组与其他各组相比差异具有统计学意义(P<0.05);对照组与其他各组的瘘口愈合率差异具有统计学意义(P<0.05);Ⅰ期缝合直肠组、Ⅰ期缝合尿道组瘘口愈合率差异无统计学意义(P>0.05)。 (2)尿道狭窄发生情况:分组治疗12周后,7 组的尿道狭窄发生率差异具有统计学意义(??=13.253,P=0.031<0.05)。本研究中,成对比较结果显示Ⅰ期缝合尿道直肠+放置肛管组与其他各组的尿道狭窄发生率差异具有统计学意义(P<0.05 );对照组与其他各组的尿道狭窄发生率差异具有统计学意义(P<0.05);Ⅱ期尿道直肠缝合组、Ⅱ期尿道直肠缝合+放置肛管组、Ⅰ期直肠缝合组、Ⅰ期尿道缝合组、Ⅰ期尿道直肠缝合组的尿道狭窄发生率差异无统计学意义(P>0.05)。 (3)手术部位瘢痕评分:采用 Kruska-Wallis H 秩和检验结果为:H=32.623,P<0.001,提示尿道直肠瘘分组治疗 12 周后各组尿道瘢痕评分差异具有统计学意义。Nemenyi 秩和检验两两比较示:Ⅰ期缝合尿道直肠+放置肛管组与其他各组的尿道瘢痕评分差异具有统计学意义(P<0.05),对照组与其他各组的尿道瘢痕评分差异具有统计学意义(P<0.05)。Ⅱ期缝合尿道直肠组、Ⅱ期缝合尿道直肠+放置肛管组、Ⅰ期缝合尿道组、Ⅰ期缝合直肠组尿道瘢痕评分差异无统计学意义(P>0.05)。 (4)组织形态学:HE染色示Ⅰ期缝合尿道直肠+放置肛管组的新生尿道上皮厚度均匀,排列规则;VG 染色示胶原纤维鲜红色,数量较少。余各组 HE 染色示尿道上皮均有不同程度的缺损,存在炎症细胞,VG 染色示存在较多的粗大胶原纤维。 结论: 1.经肛门直肠拖出冷刀切开尿道膜部和直肠组织术中操作简单、手术用时短、术后并发症少,建模尿道直肠瘘犬动物模型稳定性重复性佳,可为医源性尿道直肠瘘的治疗提供可靠的实验对象。 2.尿道直肠瘘发生后应及早进行Ⅰ期缝合尿道直肠组织,同时联合肛门置入肛管可以排出肠道内气体,降低新修补瘘口承受的压力,提高瘘口修补的成功率并降低尿道狭窄的发生率。