香柚中类柠檬苦素和柚皮苷提取纯化及二氢查尔酮合成

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本论文以湖南香柚为原料,在研究建立分光光度法快速测定类柠檬苦素和柚皮苷的方法基础上,优化了超声辅助提取类柠檬苦素和柚皮苷的工艺条件,并对大孔树脂分离纯化工艺进行了初步探究;同时以实验室提取纯化的柚皮苷为原料,研究了二氢查尔酮合成反应中各个因素对反应的影响。其主要研究结果如下:研究内容主要分为以下三部分:1.采用分光光度法分别建立了类柠檬苦素和柚皮苷含量的测定方法。以二甲氨基苯甲醛(DMAB)作显色剂,确定柠檬苦素标准液扫描最大吸收波长为500nm,建立吸光度与浓度的线性回归方程为:A=0.0036C+0.0129,相关系数r=0.9984;利用NaOH对柚皮苷开环显色特性,在波长370nm处,其柚皮苷标准品溶液校准曲线:A=0.0261C+0.0185,r=0.9997。此法不需要昂贵的设备,操作简单,在线性范围内适用于柚籽中类柠檬苦素和柚皮中柚皮苷、生物类黄酮含量的测定。2.对柚籽中类柠檬苦素的提取、分离纯化工艺进行了研究。以乙醇为提取溶剂,引入超声提取技术强化浸提效果,通过对类柠檬苦素提取的单因素实验和L9(34)正交试验,确定类柠檬苦素提取的最优提取条件为:料液比1:10(W:V)、超声时间30min、乙醇浓度70%,重复提取两次可达基本提取完全。在柠檬苦素纯化工艺中,采用大孔吸附树脂分离技术,对影响分离纯化的各因素进行探究。通过比较D3520、D4020、NKA、NKA-9、AB-8五种大孔树脂的比吸附量、吸附率、解吸率和收率,选定D4020型作为类柠檬苦素的树脂。D4020分离纯化提取液的最佳工艺条件为吸附流速1mL·min-’,70%乙醇洗脱,解吸流速0.7 mL·min-’,纯化后类柠檬苦素纯度达83.77%。该工艺分离纯化效果好,成本低。3.在提取柠檬苦素的同时,对柚皮中柚皮苷进行了分离纯化工艺研究。四种大孔吸附树脂对柚皮苷的静态吸附和解吸效果比较表明,AB-8是较理想的纯化柚皮苷的树脂。其纯化工艺参数为:上样流速为3BV·h-1,上柱浓度为2.Omg·mL-1,0.05mo1·L-1氢氧化钠为洗脱液,洗脱流速为1BV·h-1,柚皮苷提纯率为77.26%。4.对固体负载氢气还原合成甜味剂(二氢查尔酮)工艺参数进行研究,试验结果表明:在25℃,氢气压力为0.02Mpa时,反应12h后,采用732型阳离子交换静置得白色针状晶体。经UV、IR、MS和NMR结构分析,该合成产物为柚皮苷二氢查尔酮。
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