时间分辨荧光免疫分析技术及测试仪的研究

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标记免疫分析技术是一大类高灵敏度、高特异性检测技术的总称,因具有许多独特优点,广泛应用于基础医学和临床各领域。近二十年来,由于新原理、新技术的不断运用,标记免疫分析技术得到了长足的发展。时间分辨荧光免疫分析技术由于具有放射免疫分析技术的灵敏性却克服了其具有放射性的缺点,成为当前标记免疫分析研究应用领域的热点之一。因此,研制灵敏度高、操作方便、经济适用的时间分辨荧光免疫分析测试仪,无论对基础医学研究还是临床应用都具有十分重要的意义。 本论文首先介绍了当前广泛应用于临床医学研究中的几种标记免疫分析方法,并详细介绍了时间分辨荧光免疫分析技术的原理和分析测试方法。然后,通过理论分析和实验,研究了稀土元素铕及其螯合物的激发和发射光谱特点,取得了一些有意义的结果。在此基础上,研究了一种广泛适用的半自动时间分辨荧光免疫分析测试仪,该测试仪可采用进口或国产的时间分辨荧光免疫分析试剂盒对多种微量物质进行检测,用途广泛。 在稀土元素铕及其螯合物激发和发射光谱的研究中,首先从三价铕离子的原子结构上,从能级跃迁的角度分析了它可能的吸收和发射光谱,然后,通过实验,采用不同波长的光激发铕离子及其配体螯合物,获得了其最佳激发波段和荧光发射波谱,实验结果表明336~337nm是激发Eu3+特征荧光的最佳波段,其荧光特征峰在610nm~620nm范围内,选择300~350nm的紫外光,有利于Eu3+的配位二酮体的激发及能量转移。并结合理论分析与实验的结果,明确了其激发机制。同时,利用光电倍增管和示波器,研究了铕离子及其螯合物的荧光寿命。为时间分辨荧光测试仪的设计制作提供了非常有价值的信息。 在光谱研究的基础上,讨论了时间分辨荧光免疫分析测试仪的各个组成部分及其技术要求,提出了脉冲氙灯和聚光滤光系统的具体实现方法,制定了合理的临床评价方案,并对制成的测试仪样机进行了临床应用性能实验。 将我们研制的时间分辨荧光免疫分析仪与国外先进同类型仪器进行一系列对比测试实验后,经相关回归分析所得出的相关系数都在99.5%以上,显著性检验小于0.01。这说明我们研制的测试仪的灵敏度、线性范围、稳定性等各项技术指标都达到或接近了国外同类型产品的水平。相对于进口的同类产品,本测试仪制作成本较低。故本测试仪是一种性能先进、经济适用的临床免疫检验系统。
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