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目的本研究旨在观察艾灸对乳腺癌患者化疗性中性粒细胞减少症（CIN）的影响,主要对白细胞（WBC）计数和中性粒细胞绝对值（ANC）的改善作用,是否可以提高化疗依从性,探讨艾灸对不良反应和生存的影响。从中性粒细胞转录组学的角度,筛选艾灸干预中性粒细胞的差异表达基因（DEGs）,以阐释艾灸改善乳腺癌化疗性中性粒细胞减少症（CIN）的效应机制。方法第一部分艾灸改善乳腺癌辅助化疗性中性粒细胞减少症的随机对照临床研究采用随机对照（分层）方法。2015年7月1日至2016年7月31日将符合纳入条件的乳腺癌术后患者98例,随机分为艾灸组和对照组,其中6例脱落,最后共纳入92例,艾灸组48例,对照组44例。艾灸取神阙、足三里（双）、三阴交（双）等,采用温和灸法,每穴每次灸15分钟,每天1次,艾灸由化疗结束后第2天开始,连续每天艾灸直至下次化疗开始前一天为止,化疗当天不艾灸,艾灸一直实施至最后一次化疗结束后3周,灸程与化疗疗程同步为4~8疗程。对照组常规处理、不采用艾灸。根据化疗方案（蒽环类、紫杉类、蒽环类联合紫杉类）进行分层分析。两组均在西医规范化的重组人粒细胞集落刺激因子（rh G-CSF）支持前提下进行治疗。通过观察骨髓抑制的程度和骨髓抑制相关严重不良事件（SAE）的发生率;分析两组间化疗依从性的差异;评价不良反应（AE）;随访患者的无病生存期（DFS）和总生存期（OS）,研究艾灸对乳腺癌患者CIN的临床疗效。第二部分乳腺癌化疗期间中性粒细胞基因表达谱变化及艾灸干预的影响研究2018年1月1日至2019年9月31日将符合纳入标准并签署知情同意书的乳腺癌化疗患者50例,随机分为干预组（IT）和对照组（OC）,剔除19例。最后转录组测序（RNA-seq）入组14例,其中干预组5例,对照组9例;实时-定量聚合酶链式反应（RT-q PCR）入组17例,其中干预组10例,对照组7例。灸穴、灸法、灸量、灸程同第一部分。提取两组化疗前（BF）和化疗后（AF）外周血中性粒细胞,应用RNA-seq和生物信息学分析,筛选DEGs和分析GO功能与KEGG通路,采用RT-q PCR对DEGs进行验证,初步探讨艾灸改善乳腺癌患者CIN的效应机制。结果第一部分艾灸改善乳腺癌辅助化疗性中性粒细胞减少症的随机对照临床研究骨髓抑制方面,第6疗程化疗后第1周,两组间WBC计数有统计学差异的趋势（P=0.084）,第7疗程化疗后第1周,艾灸组WBC计数显著高于对照组（P=0.008）;第4疗程,艾灸组ANC正常（0级）高于对照组,并在第5和第7疗程,均有统计学差异的趋势（P=0.057和P=0.051）,第7疗程,艾灸组1级ANC降低显著低于对照组（P=0.006）;应用蒽环类和紫杉类联合方案65例（70.7%）,从第4疗程开始,WBC计数最低值和ANC最低值高于对照组,其中,6个疗程者艾灸组始终高于对照组。AE方面,艾灸组2~3级严重恶心明显少于对照组（P＜0.05）;骨、关节、肌肉疼痛和切口疼痛,艾灸组明显少于对照组（P＜0.05）;艾灸组眩晕显著少于对照组（P=0.002）;艾灸组潮热多于对照组,有统计学差异趋势（P=0.092）;艾灸组无烫伤等不良反应。骨髓抑制相关SAE方面,艾灸组发热性粒缺（FN）少于对照组,有统计学差异趋势（P=0.051）;艾灸组3~4级骨髓抑制（WBC和/或ANC降低）明显少于对照组（P＜0.05）;化疗减量艾灸组少于对照组,有统计学差异的趋势（P=0.100）。两组生存无明显差异（P＞0.05）。第二部分乳腺癌化疗期间中性粒细胞基因表达谱变化及艾灸干预的影响研究RNA-seq筛选出对照组治疗前后DEGs 1092个,其中上调基因77个,下调基因1015个;干预组治疗前后DEGs 571个,其中上调基因311个,下调基因260个;与对照组比较,干预组治疗后DEGs 707个,其中上调基因663个,下调基因44个。采用GO功能和KEGG富集分析,艾灸对乳腺癌化疗患者中性粒细胞基因表达谱的影响,与BMP信号通路、nc RNA处理、细胞增殖调节以及Gn RH信号通路、核糖体和溶酶体相关。应用RT-q PCR对各组DEGs进行了验证,发现乳腺癌常规化疗患者,中性粒细胞中的基因CD177化疗后较化疗前表达明显上调（P＜0.05）,TSC22D1表达有下降趋势（P=0.094）。在艾灸干预下,TSC22D1、ANKFY1、ITGB3表达均明显上调（P＜0.05）。结论艾灸能一定程度上改善乳腺癌患者CIN,尤其化疗第7疗程,对WBC计数和1级ANC降低有作用,对蒽环类联合紫杉类大剂量长疗程的化疗方案,效果尤其明显,艾灸能降低骨髓抑制相关SAE的发生率,提高乳腺癌化疗的依从性和安全性。艾灸能改善乳腺癌CIN,其机制可能与调节中性粒细胞基因表达谱有关。RNAseq结合生物信息学分析发现,艾灸能上调乳腺癌化疗后中性粒细胞TSC22D1、ANKFY1和ITGB3的m RNA表达水平,主要与BMP信号通路、nc RNA处理、细胞增殖调节以及GnRH信号通路、核糖体和溶酶体相关。