【摘 要】
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本试验成功分离提取了猪附红细胞体的基因组DNA,根据猪附红细胞体16s rRNA基因的序列,设计了特异性引物,进行了PCR扩增,成功的克隆了该基因。并初步建立了猪附红细胞体病的PC
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本试验成功分离提取了猪附红细胞体的基因组DNA,根据猪附红细胞体16s rRNA基因的序列,设计了特异性引物,进行了PCR扩增,成功的克隆了该基因。并初步建立了猪附红细胞体病的PCR检测技术,同时进行了特异性和敏感性试验。试验结果显示,用特异性引物对所分离提取的基因进行PCR扩增,扩增出了一条约936bp的基因片段,并成功的将该基因克隆于PMD-18T载体中,经酶切分析、PCR鉴定以及序列分析进一步验证,所克隆的基因为猪附红细胞体特异性基因。同时利用PCR技术对40头份猪血液样品进行检查,检出率为90%,经特异性和敏感性试验进一步证明,所建立的PCR方法特异、快速、敏感,可以用于诊断猪附红细胞体病,是一种有效的病原诊断方法。 试验结果表明,该基因的成功克隆为明确附红细胞体的基因结构和进一步对该基因进行表达提供了物质材料,并为了解其流行病学及致病机理都有着十分重要的参考价值。PCR诊断方法对诊断猪附红细胞体病具有较高的特异性和敏感性,同时利用PCR进行检测该病还具有抗原用量少、简单、快速、准确、适合于实验室检查等优点,为猪附红细胞体病的诊断提供了一种可靠的试验手段。
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