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目的:栀子豉汤为《伤寒论》治疗“虚烦”而又“心中懊恼”的名方,现代药理学研究发现栀子、淡豆豉均有降低血糖,改善糖耐量的作用,关于栀子豉汤的相关研究尚未见报道。本研究采用胰岛素抵抗大鼠模型,通过观察胰岛素抵抗大鼠肝组织胰岛素受体表达变化及影响胰岛素信号转导的相关因素的变化。在整体与分子水平探讨栀子豉汤改善2型糖尿病胰岛素抵抗的部分分子机制,并通过观察自发性高血压大鼠血压及血管紧张素II 1型受体表达的变化,初步探讨栀子豉汤对血管紧张素II影响胰岛素转导通路而致胰岛素抵抗的作用。为古方新用提供了理论及实验依据。方法:1栀子豉汤对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的影响采用小剂量链脲佐菌素加高脂饲料方法建立Wistar大鼠2型糖尿病经典模型。依血糖值随机分为五组:模型对照组,栀子豉汤低剂量组(4g生药/kg),栀子豉汤中剂量组(8g生药/kg),栀子豉汤高剂量组(16g生药/kg)及阳性药罗格列酮组(1.8mg/kg.d),另取10只Wistar大鼠做为空白对照组,给予常规饲料喂养。空白对照组与模型对照组灌服蒸馏水。给药(水)容量为10mL/kg,连续给药8周,末次给药后禁食十二小时,取血、胰腺、肝脏进行相关指标检测。1.1血液生化检测:断头取血,低温离心,分离血清,检测空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血清胰岛素(FINS)、肿瘤坏死因子- a(TNF-a)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)等,由公式ISI=ln[1/(FPG×FINS)]计算胰岛素敏感指数(ISI)。1.2胰腺组织形态学检测:取胰腺组织10%甲醛固定,石蜡切片,HE染色制片观察胰腺组织形态的变化。1.3肝细胞膜胰岛素受体(InsR)mRNA定量分析:迅速取出肝脏, RT-PCR法测定肝组织InsR mRNA的表达。2栀子豉汤对自发性高血压大鼠血管紧张素II 1型受体表达的影响选取SHR大鼠50只,依据血压随机分为五组,模型对照组、阳性药卡托普利组(2mg/kg)、栀子豉汤低剂量组(4g生药/kg)、栀子豉汤中剂量组(8g生药/kg)、栀子豉汤高剂量组(16g生药/kg),给药容量10mL/kg,连续给药28天,分别于第7天、14天、21天、28天测量每只大鼠的血压值。2.1栀子豉汤对自发性高血压大鼠血压的影响采用BESN-II多通道动物无创测压系统测定各组动物的收缩压值。2.2主动脉AT1R mRNA表达水平检测Trizol法提取主动脉组织总RNA,RT-PCR法测定主动脉AT1R mRNA的表达。2.3心肌组织AT1R mRNA表达水平检测Trizol法提取心肌总RNA,RT-PCR法测定心肌AT1R mRNA的表达。结果:1栀子豉汤对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的影响1.1对血液生化指标的影响1.1.1对FPG、HbA1c水平的影响:模型对照组FPG及HbA1c水平较空白对照组显著升高(P<0.01),各给药组较模型对照组有不同程度的降低(P<0.01或P<0.05);1.1.2对FINS水平、ISI的影响:模型对照组FINS较空白对照组显著升高(P<0.01);栀子豉汤组低、中、高剂量组及阳性药组FINS较模型对照组显著降低(P<0.01)。模型对照组ISI较空白对照组显著降低(P<0.01);各给药组较模型对照组ISI明显升高(P<0.01);1.1.3对TNF-α水平的影响:模型对照组TNF-α水平较空白对照组显著升高(P<0.01);栀子豉汤组低、中、高剂量组及阳性药组TNF-α水平较模型对照组明显降低(P<0.01);1.1.4对SOD活性、MDA水平的影响:模型对照组SOD水平较空白对照组显著降低(P<0.01),栀子豉汤中、高剂量组及阳性药组SOD较模型对照组有明显的升高(P<0.01或P<0.05),栀子豉汤低剂量组较模型对照组有升高的趋势,但无显著差异(P>0.05)。模型对照组MDA含量较空白对照组明显升高(P<0.01),栀子豉汤各剂量组及阳性药组MDA含量较模型对照组显著降低(P<0.01或P<0.05)。1.2胰腺组织形态学检查模型对照组较空白对照组胰岛明显萎缩,部分胰岛细胞胞浆内有空泡变性,细胞核固缩,视野中胰岛数量显著下降,体积缩小。栀子豉汤中、高剂量组及阳性药组较模型组胰岛细胞数量有明显增多,空泡明显减少,并且视野中胰岛组织完整,岛形饱满,境界清晰。1.3对肝组织InsR mRNA表达水平的影响模型对照组InsR mRNA表达较空白对照组明显降低(P<0.01);与模型对照组相比较,栀子豉汤各剂量组及罗格列酮组InsR mRNA表达明显升高(P<0.01或P<0.05)。2栀子豉汤对自发性高血压大鼠AT1 mRNA表达的影响2.1对自发性高血压大鼠血压的影响栀子豉汤低剂量组血压较模型对照组有降低趋势,但无显著差异(P>0.05),栀子豉汤中、高剂量组及卡托普利组血压较模型对照组显著降低(P<0.01或P<0.05)。2.2对自发性高血压大鼠主动脉AT1R mRNA表达的影响与模型对照组比较,栀子豉汤中剂量组、高剂量组及卡托普利组AT1R mRNA表达明显降低(P<0.01),栀子豉汤低剂量组AT1R表达水平下降,但无统计学意义(P>0.05)。2.3对自发性高血压大鼠心肌AT1R mRNA表达的影响与模型对照组比较,栀子豉汤各剂量组及卡托普利组AT1R mRNA表达不同程度的下降(P<0.01或P<0.05)。结论:1栀子豉汤可降低FPG、HbA1c、FINS水平,改善2型糖尿病大鼠胰腺组织的损伤,具有提高胰岛素敏感性,改善胰岛素抵抗的作用。2栀子豉汤改善胰岛素抵抗作用可能与上调肝脏胰岛素受体InsR mRNA的表达有关。3栀子豉汤可降低肿瘤坏死因子α水平,其可能降低肿瘤坏死因子α对胰岛素信号传导的抑制作用。4栀子豉汤可降低MDA水平,提高SOD水平,改善氧化应激。5栀子豉汤可下调血管紧张素II 1型受体mRNA的表达,可能通过阻断RAS,改善胰岛素抵抗;降压作用及对心脏的保护作用也可能与下调自发性高血压大鼠主动脉、心肌AT1 mRNA表达有关。