【摘 要】
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基因治疗是二十世纪八十年代后期出现的新兴边缘科学，其又可分为正义基因疗法和反义基因疗法：正义基因疗法是在DNA或RNA水平上把某些外源目的基因导入相应的靶细胞，持续表达目的
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基因治疗是二十世纪八十年代后期出现的新兴边缘科学，其又可分为正义基因疗法和反义基因疗法：正义基因疗法是在DNA或RNA水平上把某些外源目的基因导入相应的靶细胞，持续表达目的蛋白从而产生特定的生物学效应以达到治疗目的；反义基因疗法是在DNA或RNA水平上阻断某些内源目的基因的异常合成。
肾上腺髓质素(adrenomedullin，AM)是1993年Kitamura等人于肾上腺嗜铬细胞瘤(phaeochromocytoma，PC)组织提取物中发现的一种生物活性肽。此后，研究人员发现肾上腺髓质素广泛表达于体内多种组织。AM具有舒张血管、降低血压、改善心脏收缩功能、增加肾脏血流、利尿利钠等多种作用，被认为是在治疗高血压、心力衰竭、肾功能衰竭等多种心血管肾脏疾病中具有巨大潜在应用价值的一种内源性多肽。
本实验中，我们设计、构建了包含AM基因编码全序列的pEGFP-N3重组载体(pEGFP-N3-AM1-2)，以表达AM基因产物-EGFP融合蛋白。另外，为了进一步提高重组质粒的疗效，本实验组其他成员尝试对重组载体pEGFP-N3-AM1-2进行了改造，构建了含有突变AM基因的pEGFP-N3重组载体(pEGFP-N3-AM1-3)。
为了探索AM基因疗法改善大鼠肾脏功能减退的作用机理。我们采用阳离子脂质体包裹转染法，以pEGFP-N3-AM1-2或pEGFP-N3-AM1-3分别转染原代培养的RMCs，48小时后，应用MTT法检测其对RMCs细胞增殖的影响，应用半定量RT-PCR方法检测其对RMCs胞内TGF-β1mRNA表达水平的影响。
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