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微悬臂阵列传感器是新型的无标记超灵敏传感器,其工作方法为将发生于微悬臂表面的化学生物反应转化为微悬臂的机械运动。本文以核酸适配子作为探针分子,探索了微悬臂阵列传感器在静态工作模式下用于生物分子和肿瘤细胞方面的识别和检测研究。本论文的主要内容如下: 1.基于核酸适配子修饰的微悬臂阵列传感器实现了对伏马菌素的无标记检测。将可以特异性识别伏马菌素的核酸适配子修饰于微悬臂阵列中的四个悬臂金表面作为探针分子,其余四个悬臂作为参比,修饰6-巯基-1-己醇排除非特异性信号。在静态工作模式下,修饰于悬臂金表面的核酸适配子与伏马菌素相互作用导致悬臂两个表面产生应力差,这个应力差驱动悬臂偏转。传感悬臂的偏转减去参比悬臂的偏转得到的差分偏转对应于核酸适配子与伏马菌素作用的特异性识别信号。悬臂的偏转值和伏马菌素在0.1~40μg/mL的浓度范围内线性相关。并且,在信噪比为3的时候,微悬臂传感器检测伏马菌素的检测限是33ng/mL。此检测方法对于伏马菌素有良好的选择性。 2.应用核酸适配子修饰的微悬臂阵列传感器实现了对肝癌细胞HepG2的识别检测。将通过细胞筛选法得到的可以特异性识别肝癌细胞HepG2的适配子修饰于微悬臂阵列的四个悬臂金表面作为传感悬臂,其余四个作为参比悬臂以消除来自于环境的非特异性信号。肝癌细胞HepG2与适配子相互识别导致悬臂表面产生压应力,使得悬臂向硅面偏转。偏转的幅度与肝癌细胞HepG2在浓度为1×103~1×105个细胞每毫升的范围内呈线性关系,检测限为300个细胞每毫升。并且,相对于人的正常肝细胞HL7702、宫颈癌细胞Hela、乳腺癌细胞MCF-7和膀胱癌细胞T24,此方法对于肝癌细胞HepG2有着良好的选择性。在肿瘤预防和诊断方面具有巨大的应用前景。 3.基于核酸适配子修饰的微悬臂传感器检测细胞色素C(cyt c)并通过赭曲霉毒素A的作用进行信号放大。微悬臂传感器的动态工作模式在气相中灵敏度很高,但是在液体中由于受到阻尼振动,灵敏度大幅下降。而微悬臂传感器的静态工作模式不受液体的影响。并且,很多方法被用来研究提高微悬臂传感器在静态工作模式下的灵敏度。Cyt c是一种存在于线粒体的球形血红素蛋白,其构象易受到外界环境的影响。本文中,通过微悬臂传感器对cyt c进行检测,并利用赭曲霉毒素A的作用使检测的信号增强。在微悬臂阵列的四根悬臂上修饰能够特异性识别cyt c的适配子作为传感悬臂,而其余四根修饰6-巯基-1-己醇作为参比悬臂。将传感悬臂的信号减去参比悬臂的信号得到微悬臂系统检测cyt c的信号。与只有cyt c的样品相比,在样品中加入赭曲霉毒素A使得微悬臂传感器检测cyt c的信号增强。而赭曲霉毒素A几乎不引起微悬臂的偏转。此方法成功地将微悬臂传感器检测cyt c的信号进行了放大。