二甲双胍（Metformin,Met）在临床上主要用于治疗Ⅱ型糖尿病。近年来,二甲双胍的研究越来越热门,主要在于其不仅是安全有效的Ⅱ型糖尿病首选药,而且有研究表明二甲双胍对其他一些疾病也有良好的预防和辅助治疗作用,比如心血管和内分泌等疾病。有报道称二甲双胍还能够预防某些恶性肿瘤的发生,具有潜在的抗肿瘤作用。塞来昔布（Celecoxib,Cel）是选择性COX-2抑制剂中的代表药物。目前临床上多用于治疗类风湿性关节炎和骨关节炎等。近年来研究发现塞来昔布能够抑制多种肿瘤的发生发展,具有良好的抗肿瘤疗效,将其用于临床辅助治疗癌症也在进一步研究中。联合用药是临床上常见的一种肿瘤治疗方案,其目的在于增强疗效,减少耐药性及不良反应的发生。为了初步了解二甲双胍的抗肿瘤疗效,本研究第一部分通过CCK8法测定8种常见细胞株在不同浓度二甲双胍作用下的细胞活力,筛选出非小细胞肺癌A549和H1299细胞株作为研究对象。进一步的,为了增大抗肿瘤疗效并减少毒副作用,通过联合二甲双胍和塞来昔布初步探索联用效果和影响因素。结果表明,二甲双胍联合塞来昔布能够显著增加对A549和H1299细胞活力的抑制;联合用药48 h对细胞活力的抑制要高于24 h。在论文的第二部分,借助LDH、EdU、Transwell、TUNEL、JC-1等实验技术,研究二甲双胍联合塞来昔布对肺癌A549和H1299细胞增殖、迁移和凋亡的影响。结果显示,二甲双胍联合塞来昔布能够抑制A549和H1299细胞增殖和迁移、促进凋亡。为了探究具体机制,本研究第三部分借助活性氧检测、免疫荧光、Western Blot等实验技术发现二甲双胍联合塞来昔布能提高A549细胞内活性氧水平,增加DNA双链断裂和损伤。进一步的,通过检测DNA损伤信号通路相关蛋白发现p53显著上调。p53上调可能会引起细胞周期阻滞、影响增殖或诱导凋亡。因此,通过添加p53抑制剂（Pifithrin-α,PFT）检测药物联用引起的周期、增殖、凋亡等改变是否由p53介导。结果表明二甲双胍联合塞来昔布通过p53使细胞周期阻滞在G1期,同时也能通过p53增强抗增殖反应,但联用引起的凋亡不受p53介导。进一步分析凋亡相关蛋白Bcl-2家族其他上游蛋白,发现二甲双胍联合塞来昔布能够显著抑制细胞内ERK和PI3K/AKT信号通路,推测联合用药引起的细胞凋亡可能通过ERK和PI3K/AKT通路介导。此外,ERK和PI3K/AKT通路的抑制也能抑制细胞的增殖和迁移。最后,通过构建裸鼠皮下肿瘤模型探究联合用药对体内肿瘤的治疗效果。结果表明二甲双胍联合塞来昔布能够抑制体内肿瘤生长,增加肿瘤组织坏死和凋亡。本文的研究为非小细胞肺癌的治疗提供了新思路。