论文部分内容阅读
目的：研究香菇多糖对辐射所致小鼠免疫应激损伤的保护作用。从整体水平验证香菇多糖的防护干预作用,并从细胞及分子水平探讨香菇多糖该作用的机制。方法：1.实验模型建立与分组：①辐射损伤模型的建立：辐射条件：全身性辐射,吸收剂量为40cGy/d,吸收剂量率为300cGy/min,皮源距为150cm,照射野为20cm×20cm,连续照射30d。②实验分组：实验小鼠分为五组,分别为：辐射模型组、正常对照组、香菇多糖高剂量组、香菇多糖中剂量组和香菇多糖低剂量组。2.T淋巴细胞提取：应用尼龙毛柱法从小鼠脾脏提取T淋巴细胞。3.NO含量测定：按照试剂盒说明书要求进行操作,测定不同组别小鼠T淋巴细胞分泌NO含量。4.IL-2含量测定：按照剂盒说明书要求进行操作,测定不同组别小鼠T淋巴细胞分泌IL-2含量。5.RNA提取：按照试剂盒说明书要求,从小鼠T淋巴细胞中提取mRNA.6.RNA逆转录合成cDNA:按照试剂盒说明书要求,从提取出的RNA合成cDNA。7.cDNA扩增：按照试剂盒说明说要求,采用荧光染料嵌合法,配制PCR反应液,进行PCR扩增。结果：在整体水平,与正常组相比,慢性低剂量辐射可导致小鼠体重增加速率下降,脾脏指数和胸腺指数显著下降,脾脏出现明显的病理性改变。与辐射组相比,香菇多糖组可明显改善上述改变。在细胞水平,与正常组相比,慢性低剂量辐射可导致小鼠T淋巴细胞活性降低,IL-2分泌减少,NO含量升高。与辐射组比较,香菇多糖组T淋巴细胞活性明显增加,IL-2分泌增加,NO含量降低,且与正常组比较,无明显差异。在分子水平,与正常组相比,慢性低剂量辐射可引起K+通道Kv1.3、Ca2+通道Orai1基因表达出现明显上调。与正常组相比,香菇多糖低剂量组和高剂量组Kv1.3、Orai1基因表达无明显差异。与辐射模型组相比,香菇多糖低剂量组Kv1.3基因表达下调、Orai1基因表达无显著差异,香菇多糖高剂量组Kv1.3、Orail基因表达均明显下调。结论：慢性低剂量辐射可导致小鼠整体及免疫系统功能改变,影响T淋巴细胞功能,引起T淋巴细胞膜上部分离子通道mRNA的表达改变,而香菇多糖可明显干预辐射所致的上述改变。表明,香菇多糖作为一种免疫调节剂,对辐射所致小鼠免疫系统T淋巴细胞损伤具有明显防护作用,而该作用可能与香菇多糖影响T淋巴细胞膜上的离子通道有一定关系。