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背景与目的： 马尾松(Pinus massoniana Lamb.)松针即松科植物马尾松的针形直叶。近年来研究发现，马尾松松针提取物富含黄酮类物质，木脂类、多种维生素、多糖类、微量元素和氨基酸等天然抗氧化活性物质，抗氧化活性有待深入研究。 目前马尾松松针抗氧化相关的研究主要集中在对其中单一成分的抗氧化活性进行独立的检测和评价，例如对黄酮类物质或者挥发油类物质的提取与分离，黄酮类物质和木脂素的化学结构分析及不同提取方法提取液的抗氧化功能评价。 然而，抗氧化活性功能的产生并不仅仅来源其中单一的活性成分，而是一个完整的系统中各组分相互的作用结果。所以，以“抗氧化活性”为质量控制目标，通过分离、纯化，鉴定从马尾松松针复杂物质体系中筛选出具有抗氧化活性的成分，研究体系中有效活性成分，揭示其抗氧化作用的物质基础、作用机制，较仅研究单一组分的抗氧化作用对认识松针抗氧化活性，有效利用松针抗氧化作用具有更加重要的作用，可为马尾松松针抗氧化功能食品研发奠定理论基础。 本研究拟以马尾松松针为原料，研究最大程度地保留松针抗氧化活性提取液的提取工艺，分离纯化条件以及其组分的构成，进行活性功能评价，并研制功能食品。 方法： 1.提取工艺方法以水浸提法提取马尾松松针抗氧化活性成分。单因素试验考察了料水比、时间和温度对浸提效果的影响。在单因素试验的基础上在各因素选取较优的两个水平进行正交试验，优选出最佳提取工艺条件。 2.分离纯化及组分分析方法采用梯度极性溶剂（石油醚、乙酸乙酯、正丁醇）萃取进行初步分离。并评价各萃取部分的总抗氧化能力，采用大孔树脂对总抗氧化能力最高的萃取部进行纯化，分级洗脱，评价各洗脱部分的总抗氧化能力，选择总抗氧化能力最强的洗脱部位进行下一步的组分分析。采用LC-MS/MS二级质谱打碎和Qtrap扫描保留峰分析，初步确定纯化中总抗氧化能力最高的部位的物质组成。 3.抗疲劳功能评价方法参照《保健食品检验与评价技术规范》（2003版）的评价方法进行动物造模，通过计算小鼠负重游泳时间和测定小鼠血乳酸、血尿素氮、肝糖原评价松针粗提液的抗疲劳效果。 4.功能饮料加工工艺通过单因素试验、正交试验法和感官评定，确定最大程度保留黄酮活性功能因子的松芹复合饮料的工艺和配方。 结果： 1.提取工艺研究结果： 1）以总抗氧化能力为质量控制目标，通过单因素分析，得到马尾松松针抗氧化活性成分提取的因素范围如下:料水比为1:15和1:20，温度为80℃和90℃，时间为60min和120min。 2）在单因素基础上应用正交试验，得到马尾松松针抗氧化活性成分提取的最优工艺条件为:料水比为1:20，浸提温度90℃，浸提时间120分钟。通过验证试验表明在最优工艺条件下提取液总抗氧化能力为191.78 U/ml。 2.分离纯化及组分分析结果： 1)马尾松松针抗氧化提取液各萃取部位的总抗氧化能力分别为石油醚部78.72U/ml，乙酸乙酯部为131.26U/ml，正丁醇部为54.14U/ml，水部为150.19U/ml。松针抗氧化提取液水部为抗氧化能力最强的部位。 2)通过静态吸附和解吸实验，以及静态吸附动力学实验综合考察，选择AB-8大孔吸附树脂为松针抗氧化提取液水部分离纯化的大孔吸附树脂。 3)通过对上样浓度、径高比、洗脱剂浓度的考察，确定AB-8大孔树脂的分离纯化条件为上样浓度1:1，大孔树脂径高比为1:13，洗脱剂乙醇的浓度为50％。 4)通过LC-MS/MS二级质谱打碎和Qtrap扫描保留峰分析，初步认定松针提取液最高总抗氧化能力的纯化液中主要含有糖类物质和黄酮类物质（槲皮素、山柰酚和原花青素低聚体）。 3.抗疲劳功效评价实验结果： 各剂量松针提取液均能延长小鼠负重游泳时间、降低尿素氮含量、降低血乳酸含量及提高肝糖原含量。其中中、高剂量松针提取液能显著延长小鼠负重游泳时间、降低尿素氮含量及提高肝糖原含量。 4.功能饮料最佳配方： 松针浸提料水比为1：10，浸提温度80℃，浸提时间90min后加入0.020%果胶酶，在50℃条件下澄清1小时。芹菜浸提料水比为1：40，浸提温度100℃，浸提时间60min后加入0.020%果胶酶，在50℃条件下澄清1小时。取已澄清的20%松针提取液和20%芹菜提取液、2%蜂蜜、1%柠檬酸进行调配，以0.1%海藻酸钠+0.1%CMC-Na作稳定剂。在此最佳配方下研制出的饮料为淡黄色、澄清液体，均匀一致，具有特殊清香风味。 结论： 1.以水浸提法在最佳提取条件下提取总抗氧化能力最高的马尾松松针粗提液，经分级萃取和大孔树脂纯化，初步认定提取液中主要抗氧化能力的物质为槲皮素、山柰酚、原花青素低聚体（OPC）。 2.马尾松松针抗氧化粗提液具有缓解体力疲劳的作用。 3.在最佳配方下研制的松针复合功能饮料，均匀一致，具有特殊松针清香风味,卫生质量达到保健食品标准要求，为松针保健品的生产提供理论依据。