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粘液(mucus)是以黏蛋白(mucins)为基础骨架成分的高水分粘性液体。鱼类的皮肤、鳃及消化道上覆盖着一层粘液,主要是由上皮中的粘液细胞(mucous cells)大量分泌。鱼类粘液在鱼体防御外界病原侵袭、信息传递、调节渗透压等方面具有重要作用,与其相关的研究正受到广泛的关注。本研究运用组织切片技术,以阿新蓝-过碘酸雪夫氏染色方法(AB-PAS)观察了健康团头鲂(Megalobrama amblycephala)消化道粘液细胞的类型,并统计了消化道不同部位粘液细胞的数量。显微镜观察团头鲂消化道存在四种不同被染颜色的粘液细胞:Ⅰ型,AB-PAS染色呈红色,含有中性黏蛋白;Ⅱ型为蓝色,含酸性黏蛋白;Ⅲ型为紫红色,同时含有酸性黏蛋白和中性蛋白,以中性黏蛋白为主;Ⅳ型为蓝紫色,同时合有两种黏蛋白,以酸性黏蛋白为主。细胞计数统计结果表明各部位黏液细胞总密度从前向后依次增大,且都大于食道黏液细胞总密度,后肠黏液细胞要明显多于其他部位。实验结果可为团头鲂消化道研究提供基础数据参考。根据已知的脊椎动物黏蛋白基因序列及实验室完成的团头鲂转录组数据库的基因部分片段,克隆获得团头鲂Muc2和Muc5b mRNA的部分序列,并通过实时荧光定量PCR (qRT-PCR)选择合适的内参基因(reference gene)作为本研究的管家基因(House-keeping gene),分析了Muc2和Muc5b在团头鲂不同组织的表达分布。氨基酸序列分析结果显示,团头鲂Muc2和Muc5b与鲤等脊椎动物有较高的同源性,其N端含有11p15黏蛋白(该类黏蛋白基因位于11p15染色体上)特异性结构域:VWD区域(von Willebrand D domain, Pfam00094保守结构域),C8区域(Pfam08742保守结构域,富含半胱氨酸,通常与VWD相邻出现),TIL区域(trypsin inhibitor-like, Pfam01826保守结构域,富含半胱氨酸)。四种内参基因(18S; RP||; Rpll3α;β-Actin)比较结果表明,RPII为本实验中团头鲂九个不同组织的最优HK基因。组织表达分析结果表明Muc2主要在前肠、中肠、后肠中高表达,在其他六个组织中不表达;Muc5b在鳃和表皮表达量相对较高,在脑、脾、肾中表达水平较低,在肝、肠道不表达。这为团头鲂黏蛋白基因研究提供了序列参考,也为在鱼类黏蛋白组织分布研究时提供数据。根据组织表达分布的结果,作者分别测定了团头鲂在饥饿胁迫20天后重摄食肠道内Muc2的变化,以及团头鲂在捕捞应激后鳃和表皮中Muc5b的表达变化。结果表明团头鲂在饥饿20天后重新摄食,肠道内Muc2表达首先急剧降低,16 h后重新恢复到正常水平;团头鲂在捕捞应激后1 h时鳃中Muc5b显著降低(P<0.05),24h时恢复初始水平;表皮中4 h时Muc5b显著上升(P<0.05),24 h时恢复到初始水平。