【摘 要】
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目的:吉西他滨是治疗局部晚期和转移性肺癌的药物之一,因其副作用及肿瘤细胞对化疗产生的耐药性,在临床治疗中疗效不尽如人意。芝麻素是具有抗癌作用的天然产物,然而,有关芝麻素联合吉西他滨用药对肺癌的抗癌作用研究非常少见,在此,我们研究了芝麻素和吉西他滨对肺癌（A549,PC9）细胞株的作用,并探讨了其潜在的机制。方法:用MTT法检测各浓度芝麻素和吉西他滨对A549和PC9细胞的存活率,算出半数抑制浓度（
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目的:吉西他滨是治疗局部晚期和转移性肺癌的药物之一,因其副作用及肿瘤细胞对化疗产生的耐药性,在临床治疗中疗效不尽如人意。芝麻素是具有抗癌作用的天然产物,然而,有关芝麻素联合吉西他滨用药对肺癌的抗癌作用研究非常少见,在此,我们研究了芝麻素和吉西他滨对肺癌（A549,PC9）细胞株的作用,并探讨了其潜在的机制。方法:用MTT法检测各浓度芝麻素和吉西他滨对A549和PC9细胞的存活率,算出半数抑制浓度（Half-inhibitory concentration,IC50）;将细胞分别分为对照组（C组,等容培养液）、芝麻素组（S组,芝麻素40μg/ml）、吉西他滨组（G组,吉西他滨1μg/ml）、芝麻素联合吉西他滨组（SG组,芝麻素40μg/ml+吉西他滨1μg/ml）。MTT法检测细胞存活率;划痕修复实验检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测细胞周期;Annexin V-FITC/PI染色法检测细胞凋亡率、TUNEL染色荧光镜下观察凋亡细胞,Western Blot检测细胞调亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3的表达,以及内质网应激相关调亡蛋白GRP78、GADD153、IRE1α、P-IRE1α、JNK、P-JNK、Caspase-12的表达。结果:1.取芝麻素（IC50）和吉西他滨（IC50）分别作用于A549和PC9细胞,MTT法显示联合组细胞存活率分别显著低于单药组,单药组细胞存活率均低于空白组,各组间比较均有统计学差异。2.划痕结果显示,联合组组划痕修复率分别显著低于单药组;单药组均低于空白组,均有统计学差异（*P＜0.05;**P＜0.01）。3.Annexin V-FITC/PI染色法结果显示,联合组细胞凋亡率分别显著高于单药组;单药组细胞凋亡率均高于空白组,其差异有统计学意义（***P＜0.001;****P＜0.0001）。4.在荧光显微镜下观察到调亡的细胞收缩,胞质皱缩,可见核碎片的调亡小体。相同视野中,联合组凋亡细胞分别显著高于单药组;单药组凋亡细胞均高于空白组,其差异有统计学意义（*P＜0.05;**P＜0.01;***P＜0.001;****P＜0.0001）。5.在A549和PC9细胞中,与空白组比较,联合组Bax/Bcl-2比值及Caspase-3蛋白表达量分别显著高于单药组;单药组蛋白表达量均高于空白组,其差异有统计学意义（*P＜0.05;***P＜0.001;****P＜0.0001）。6.流式细胞术检测显示,联合组处理细胞后细胞G1期阻滞显著分别显著高于单药组;单药组均高于空白组,其差异有统计学意义（*P＜0.05;***P＜0.001;****P＜0.0001）。7.在A549和PC9细胞中,与空白组相比,联合组较单药组GRP78、GADD153、IRE1α、P-IRE1α、JNK、P-JNK、Caspase-12的蛋白表达显著上调,其差异有统计学意义（**P＜0.01;***P＜0.001;****P＜0.0001）。研究表明,IRE1α/JNK信号通路参与了芝麻素与吉西他滨诱导非小细胞肺癌细胞凋亡。结论:1.芝麻素有效增强吉西他滨对人肺腺癌A549和PC9细胞的抗增殖作用和抑制迁移作用。2.芝麻素可能增强吉西他滨在人肺腺癌A549和PC9细胞G0/G1期细胞周期阻滞作用。3.内质网应激途径IRE1α/JNK通路可能参与芝麻素增强吉西他滨诱导人肺腺癌A549和PC9细胞的凋亡作用。
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