基于脑-肠轴和5-HT通路研究隔药灸脐法治疗IBS-D的机制

来源 :山东中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zilong2006min
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目的:观察隔药灸脐法和5-HT2C拮抗剂对IBS-D模型大鼠症状、内脏敏感性以及血浆、海马、脊髓、结肠5-HT2C、CGRP和SP表达含量的影响,从脑-肠轴和5-HT通路角度探讨隔药灸脐法治疗IBS-D的机制。方法:随机将SPF级SD健康雄性大鼠分为正常组、模型组、脐灸组和拮抗组,每组10只。正常组不做任何处理,其余三组通过乙酸灌肠联合慢性捆绑束缚刺激来建立IBS-D模型大鼠;正常组和模型组不做治疗,只做和拮抗组同步的抓取固定和腹腔生理盐水注射;脐灸组每3天做1次隔药灸脐法治疗,每次灸10壮(约30min),治疗3次,同时给予拮抗组同步的腹腔生理盐水注射;拮抗组每天给予1次腹腔注射5-HT2C受体拮抗剂,1mg/kg,共注射10次,同时做与脐灸组相同的隔药灸脐法治疗。治疗后评价各组大鼠4h进食饮水量、4h粪便点数、体质量增长率、粪便含水量、粪便性状、AWR评分,后处死取材,采用Elisa法、Western blot法检测蛋白表达含量,免疫组化法检测蛋白定位表达,q RT-PCR法检测m RNA表达含量,采用单因素方差分析多组间数据,数据以均数±标准差((?)±S)表示。结果:1.隔药灸脐法和5-HT2C拮抗剂对IBS-D模型大鼠症状和内脏敏感性的影响与正常组相比,模型组大鼠出现精神萎靡、毛色晦暗,粪便含水量、排便次数、粪便性状评分和AWR评分显著升高(P<0.01),进食量和体质增长率显著下降(P<0.01);与模型组相比,脐灸组显著改善了IBS-D模型大鼠的上述症状(P<0.01);与脐灸组相比,拮抗组治疗IBS-D模型大鼠的疗效显著下降(P<0.01)。2.隔药灸脐法和5-HT2C拮抗剂对IBS-D模型大鼠血浆、海马、脊髓、结肠5-HT2C、CGRP、SP蛋白的影响与模型组相比,脐灸组显著下调了IBS-D模型大鼠血浆、海马、脊髓、结肠5-HT2C、CGRP、SP蛋白水平(P<0.01);与脐灸组相比,拮抗组下调5-HT2C、CGRP、SP蛋白的效力显著下降(P<0.01)。3.隔药灸脐法和5-HT2C拮抗剂对IBS-D模型大鼠海马、脊髓、结肠5-HT2C、CGRP、SP m RNA的影响与模型组相比,脐灸组显著下调了IBS-D模型大鼠海马、脊髓、结肠5-HT2C、CGRP、SP m RNA水平(P<0.01);与脐灸组相比,拮抗组下调5-HT2C、CGRP、SP m RNA的效力显著下降(P<0.01)。结论:1.隔药灸脐法可能通过降低脑-肠轴上5-HT通路活性,进而下调5-HT通路中CGRP、SP等相关脑肠肽水平来改善IBS-D模型大鼠的症状。2.5-HT通路可能是隔药灸脐法治疗IBS-D的靶点之一。
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