Dlk1-Dio3印记基因簇是小鼠染色体上极其重要的一个印记基因簇,位于小鼠12号染色体末端,长度约为1Mb。在Dlk1-Dio3印记基因簇上包含3个Dlk1、Rtl1和Dio3父本表达的编码基因、母本表达的长非编码RNA以及mi RNAs和sno RNAs,其对小鼠的发育以及疾病发生方面都有重要影响,如该区域内印记基因的表达异常,就会引起疾病,发育迟缓或生物个体的死亡等。Meg8-DMR是本实验室在Dlk1-Dio3印记基因簇内发现的第一个母本甲基化的差异甲基化区域,其调控作用以及在生物体发育过程中的功能还未知,因此本课题以Meg8-DMR敲除小鼠为模型,研究其对小鼠骨骼肌发育的影响。很可能具有重要影响。首先利用本实验室构建的Meg8-DMR敲除小鼠模型,获得了E18.5的胚胎、四周龄和六周龄的Meg8-DMR敲除小鼠,和并对其体重、形态学以及肌肉变化、以及对印记基因簇内的各个印记基因的表达水平进行了分析和研究。结果显示:Meg8-DMR敲除的小鼠与野生型小鼠相比在体重上出现轻微的体重降低变化,形态学分析表明Meg8-DMR敲除对小鼠肌肉发育没有产生显著的抑制作用;Meg8-DMR的缺失会影响肌肉组织内印记基因的表达,Irm在母本缺失及双敲型中出现了上调趋势;Rtl1和Meg8在父本缺失中出现上调趋势;AB063319在父本缺失中存在下调,在母本缺失和双敲型中都出现上调;Dlk1在父本缺失及母本缺失中有下调变化,在双敲型中,下调会更明显。其次,构建了Meg8-DMR敲除的C2C12细胞系,研究了其增殖和分化情况。结果显示Meg8-DMR敲除会抑制C2C12细胞的增殖和分化。综上所述,Meg8-DMR缺失会对小鼠的肌肉发育并未产生显著的抑制作用,但影响印记区内基因的表达;同时对C2C12细胞的增殖和分化产生了抑制作用。研究结果为进一步阐明Meg8-DMR对骨骼肌发育及其调控机制奠定良好的基础。