随着生产技术的发展,生物酶在工业生产过程中占有越来越重要的地位。工业上不可避免的会有盐环境存在,为了使生物酶在含盐环境中依然能发挥作用,寻找耐盐性的酶变的尤为重要。嗜盐菌具有生产耐盐性酶的潜力,所以本研究从中国自贡古盐井卤水中,筛选出一株中度嗜盐菌S2,检测发现S2可以产酯酶和脂肪酶,经16S rRNA鉴定分析S2为Chromohalobacter canadensis strain,测序结果已提交到GenBank,登录号为KY454851.1。中度嗜盐菌的盐适应机制是利用相容性渗透机制来抵抗外界的盐环境。相容性溶质是指类能与细胞体系相容,同时又不影响其他生物大分子功能的小分子有机物。相容性溶质在生理pH范围内极性,不带电荷和易溶。用高效液相色谱法（HPLC）和质谱法（MS）分析确定S2以合成相容性溶质四氢嘧啶来适应高盐环境。根据GenBank中已知该菌属的酯酶基因序列设计引物,从S2基因组DNA中成功克隆出酯酶基因EST,EST核酸序列全长646 bp,编码213个氨基酸,GenBank登录号为MF769788。将EST连接到表达载体pET28a上,转化到大肠杆菌BL21（DE3）中,用最终浓度250μmol/L的IPTG在16℃,150 r/min的条件下进行诱导表达,SDS-PAGE检测发现表达出了一个蛋白分子量约为23 KDa的融合蛋白,命名为EstS2。氨基酸序列分析结果表明该酯酶属于新的酯酶家族。利用镍离子螯合树脂亲和纯化重组蛋白,获得纯化后的酯酶EstS2。分析EstS2的酶学性质。结果显示,EstS2的最适温度为35℃,最适pH 8.5,并且在30℃⁵0℃的范围内可以保持较高酶活。在0.25 mol/L NaCl时酶活力下降为63.1%,随着NaCl浓度增加酶活性逐渐下降为零。另外,EstS2对部分金属离子和化学试剂具有抗性。对S2发酵液进行纯化,得到一个分子量约为58 KDa的脂肪酶LipS2。LipS2对碳链长度大于12的甘油三酯和一些由多不饱和脂肪酸组成的植物油都具有很好的水解活性。LipS2在2.5 mol/L³.5 mol/L NaCl范围内酶活性较高,在没有NaCl存在时没有酶活性,说明LipS2为嗜盐酶。在温度为55℃,pH8.5,NaCl浓度为3 mol/L时达到最高酶活力。值得注意的是,LipS2的热稳定性和pH稳定性随NaCl浓度的变化而变化,当NaCl浓度为3 mol/L时酶活力达到最佳。Zn²⁺、Cu²⁺、Mn²⁺、Fe²⁺和Hg²⁺对LipS2酶活力有抑制作用,而Mg²⁺和Ca²⁺有促进作用。此外,LipS2对甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮等有机溶剂有明显的耐受性,而且正己烷和苯能对LipS2的酶活性有明显的增强作用。非离子表面活性剂能提高LipS2的酶活性,而离子型表面活性剂会降低酶活性。