虎苓贴膏体外抑菌及对兔化脓性膝关节炎CRP、NEUT、滑膜的影响

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目的:通过两个实验为虎苓贴膏临床治疗化脓性关节炎提供实验依据。实验一通过体外抑菌实验,检验虎苓贴膏煎剂对金黄色葡萄球菌的抑制作用;实验二通过动物实验,探讨虎苓贴膏对化脓性关节炎模型兔血液中性粒细胞、C反应蛋白和关节滑膜的影响,验证其对化脓性关节炎的有效性。  方法:首先进行体外抑菌实验,定性实验(琼脂扩散纸片法)确定虎苓贴膏煎剂对金黄色葡萄球菌是否有抑制作用;定量实验(平板稀释法)检测不同浓度下虎苓贴膏煎剂对金黄色葡萄球菌的抑制情况。然后进行动物实验,将60只新西兰大耳兔随机分成为6组,A组空白对照组(不做任何处理),B组造模对照组(造模成功后不做处理),C组虎苓贴膏组(造模成功后外敷虎苓贴膏),D组青霉素组(造模成功后肌注青霉素),E组青霉素加虎苓贴膏组(造模成功后外敷虎苓贴膏并且肌注青霉素),F组预防组(注射细菌后外敷虎苓贴膏)。给药方法:造模成功后开始给药,膏药用法是分别以造模进针点为中心,外敷虎苓贴膏,面积包绕膝关节为度,每日一次(相当于成人每曰每次用量1/3),连续给药2周。青霉素组给予肌肉注射青霉素40万单位,每日两次(相当于成人每日每次用量1/3),连续给药2周。空白组及模型组未予给药;预防组在注射细菌后外敷虎苓贴膏。造模方法采用左膝关节腔内注入金黄色葡萄球菌悬液造模法,于造模前、造模成功时及用药第一周和第二周观测兔:饮食、体温、心率,肢体肿胀程度、运动情况;实验室项目:血常规(白细胞和中性粒细胞)、CRP、血沉等指标的变化;运用SPSS软件进行统计学处理分析。实验完毕后用空气栓塞法将实验动物处死,解剖分离出患肢滑膜,行滑膜组织病理检验。  结果:体外抑菌实验结果:定性实验,可以通过抑菌圈的直径看到对细菌的抑制作用;定量实验,可以直观看到不同浓度虎苓贴膏煎剂均对金黄色葡萄球菌有抑制作用,最小抑菌浓度为0.125g/ml。动物实验结果:造模2周后,造模动物均见左膝关节肿大(均超过1cm),左侧肢体活动障碍、食量下降、左膝关节局部体温升高等;血常规示:白细胞计数及中性粒细胞、CRP都升高;抽取患膝关节腔内积液,行细菌培养均有金黄色葡萄球菌生长。连续给药2周后检测血常规,虎苓贴膏组、青霉素组、虎苓贴膏加青霉素组中兔膝血液中性粒细胞计数及CRP低于造模照组,通过SPSS19.0软件对各组间比较,P<0.05,有统计学意义。实验结束空气栓塞处死动物,解剖左膝关节,见B、C、D、E、F组膝关节增粗,关节腔内见脓性液及坏死组织,滑膜充血水肿,部分见软骨缺失,以B组最为明显,而C、D、E、F组与B组比较软骨破坏程度轻;光学显微镜下,C、D、E、F组的滑膜组织炎细胞浸润均较B组有改善,中性粒细胞、多核巨细胞炎性细胞浸润数量明显减少。  结论:体外抑菌实验:虎苓贴膏煎剂金黄色葡萄球菌有明显的抑制作用。动物实验:虎苓贴膏及青霉素都能降低兔膝化脓性关节炎因感染而升高的中性粒细胞、CRP,并且其二者联合应用,治疗效果最优。外用虎苓贴膏治疗化脓性关节炎,可以抑制细菌、减轻关节肿胀、阻止疾病发展,同时虎苓贴膏对化脓性关节炎也有一定的预防作用。
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