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随着现代畜牧业发展,冷冻精液在人工受精中的需求日渐增大,且对冻精质量要求越来越高。卵黄（egg yolk,EY）作为精液冷冻保存中常用非渗透性冷冻保护剂,其成分复杂、易受病原微生物污染,不易制备标准浓度的冷冻保护剂。为探究成分稳定无污染的冷冻稀释液,本研究使用不同浓度大豆卵磷脂（soybean lecithin,SL）替代鸡蛋卵黄对山羊精液进行超低温冷冻保存。首先,研究筛选出了最佳的大豆卵磷脂添加浓度,其次,探讨了大豆卵磷脂和卵黄的协同保护作用,最后,在大豆卵磷脂稀释液中添加不同浓度原花青素（procyanidins,PC）,探明其对山羊冻精的抗氧化保护作用。本研究为大豆卵磷脂在山羊精液冷冻保存中的应用提供了实验依据。具体研究结果如下:1. 为研究大豆卵磷脂在山羊精液冷冻保存过程中的卵黄替代作用。本试验以20%鸡蛋卵黄（V/V）为对照,在山羊冻精基础稀释液中分别添加0.5%、1%、2%、3%大豆卵磷脂（m/V）,冷冻-解冻后经精子质量和抗氧化性指标检测。结果表明,精液解冻后,与20%卵黄对照组相比,2%大豆卵磷脂组精子活力、活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性无显著性差异（P>0.05）,但比较0.5%、1%和3%大豆卵磷脂组显著提高（P<0.05）。添加2%大豆卵磷脂组解冻后精子ROS和MDA含量最低,SOD活性最高,与20%卵黄对照组相比无显著性差异（P>0.05）,较0.5%、1%和3%大豆卵磷脂组精子抗氧化能力显著提高（P<0.05）。腹腔镜人工输精后,卵黄组和大豆卵磷脂组分别获得了81.82%和78.75%的45d B超检测妊娠率,72.73%和78.75%的妊娠产仔率,二者亦差异不显著（P>0.05）。稀释液中添加2%大豆卵磷脂能够替代卵黄作为山羊精液冷冻保护剂,从而避免卵黄作为动物源冷冻保护剂在冷冻过程中交叉传染疫病的风险。2. 在山羊冻精基础稀释液中分别添加10%EY+2%SL、20%EY+1%SL、20%EY+2%SL,对照组分别添加20%EY和2%SL,对比研究冻融后精子质量指标和抗氧化指标。结果表明:当冷冻稀释液中联合添加10%EY+2%SL,解冻后精子活力、活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性与20%EY和2%SL对照组相比无显著性差异,相较20%EY+1%SL和20%EY+2%SL联合添加组显著提高（P<0.05）;与20%EY和2%SL组相比,联合添加10%EY+2%SL组精子解冻后ROS和MDA含量以及SOD活性无显著性差异,但较另外两个联合添加组精子抗氧化能力显著提高（P<0.05）。山羊精液冷冻过程中,SL可替代或者部分替代EY进行添加,EY和SL的联合添加对山羊冻精无协同作用,20%EY中联合添加不同浓度的SL则会加大对冷冻精子的氧化损伤。3. 在以2%大豆卵磷脂稀释液的基础上,分别在冷冻保护剂中添加最终浓度为0μg·m L-1、10μg·m L-1、20μg·m L-1、40μg·m L-1、60μg·m L-1的原花青素,冷冻-解冻后分别对精子物理性、抗氧化和凋亡指标进行检测。结果表明,在大豆卵磷脂稀释液中添加PC浓度为40μg·m L-1（SL3组）时,解冻后精子活力、活率、顶体完整率、线粒体活性和质膜完整率最高,分别达58.49%、53.45%、55.37%、55.16%和50.46%,显著高于EY组和SL0组（P<0.05）。SL3组解冻后精子的SOD值(224.87U·m L-1)和GSH-PX含量(129.6 U·L-1)最高,总Caspase凋亡率（54.33%）和TUNEL凋亡率（41.36%）最低,与EY组和SL0组差异显著（P<0.05）。当PC的添加浓度提高至60μg·m L-1（SL4组）时,解冻后精子质量显著下降,表现为对精子毒性作用。添加PC浓度为40μg·m L-1可降低精子氧化损伤和细胞凋亡,提高冻精品质。综上,在山羊精液冷冻基础稀释液中添加2%大豆卵磷脂可有效替代20%卵黄作为液氮超低温冷冻保护剂,EY和SL的联合添加对山羊冻精无协同作用,且在2%大豆卵磷脂稀释液中添加外源抗氧化剂PC,可有效提高精子抗氧化能力。