目的本研究基于生物信息学,分析精子相关抗原5（sperm associated antigen 5,SPAG5）在膀胱癌的表达情况和临床预后,并在临床病理标本中进行验证,旨在为以后膀胱癌的个体化和精准化的诊断与治疗提供新的靶点。方法通过检索Oncomine数据库分析SPAG5在不同膀胱癌数据中m RNA的表达情况。下载GEO数据库GSE13507中SPAG5的临床病理信息,通过卡方检验分析SPAG5基因表达与临床病理特征的相关性。Kaplan-meier和Log-rank进行生存分析。通过c Bio Portal网站鉴定膀胱癌中SPAG5的基因变异类型和频率,并分析基因突变与预后的关系。通过TIMER网站分析SPAG5和膀胱肿瘤免疫细胞浸润的相关性。利用Linked Omics和DAVID网站分析SPAG5的相关表达基因和KEGG通路,通过免疫组化验证膀胱癌与癌旁组织SPAG5的蛋白表达水平,并分析与临床病理特征之间的关系。结果SPAG5在膀胱癌组织中的m RNA表达水平显著高于正常组织,且与年龄、M分期无关与性别、侵袭性、肿瘤分级、T分期、N分期有关。SPAG5高表达的患者其特异性生存率和总生存率均低于低表达患者。m RNA上调是SPAG5在膀胱癌中最常见的变异类型。SPAG5与细胞纯度、CD8+T细胞、树突状细胞的表达成正相关,其可能参与肿瘤的免疫浸润。SPAG5的相关基因主要与细胞周期、卵母细胞分裂、趋化因子信号通路、Gn RH信号通路、同源重组、P53信号等有关。免疫组化验证显示SPAG5在膀胱癌组织表达水平显著高于癌旁组织,且与侵袭性、T分期有关,与性别、年龄、疾病分级、肿瘤大小、N分期无关（P>0.05）。结论SPAG5的过表达是膀胱癌预后不良的重要因素,SPAG5在膀胱癌中出现基因突变,并且可能参与肿瘤的免疫浸润。