目的:观察Rho激酶抑制剂法舒地尔(Fasudil)和Th17细胞对尘螨(House dust mite,HDM)诱导的过敏性哮喘的影响。方法:将24只C57BL/6雌性小鼠,随机分成4组:哮喘组,法舒地尔干预组,PBS对照组,法舒地尔对照组。前两组于实验的第0、3、5、7天,气管内注射15g HDM(溶解于30l PBS)致敏,实验最后3天再气管内注射HDM液每日一次进行激发,共16天建立哮喘模型;后两组在相同时间气管内注射30ml PBS作为哮喘模型对照组。其中法舒地尔干预组和法舒地尔对照组每日腹腔注射30mg/kg剂量的法舒地尔,哮喘组和PBS对照组给予等量的PBS。末次激发24小时后,收集各组小鼠的支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage,BAL)进行细胞计数和Kwik-Diff染色;肺组织制成石蜡切片,进行H&E和PAS染色作组织病理学观察,确定浸润细胞数量、类型及黏液分泌情况;采用酶联免疫吸附试验测定各组BAL液中气道炎症相关细胞因子IFN-g、IL-4、IL-5,IL-17及炎症趋化因子Eotaxin的变化;用实时荧光定量PCR检测上述细胞因子和Gob-5的m RNA表达水平;应用流式细胞术检测各组脾细胞中Th1、Th2、Th17、Treg细胞分别所占的比例。结果:1.两个哮喘模型组与两个对照组分别作比较,BAL细胞计数增多,嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞数目均显著增加(P<0.05);法舒地尔干预组与哮喘组相比,BAL细胞总数及嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞的浸润数目均减少,差异有统计学意义(P<0.05)。2.肺组织切片染色结果显示,法舒地尔干预组的支气管炎性症状较哮喘组轻,气管内黏液分泌比哮喘组少,但两组均比对照组严重。两个对照组的肺组织结构完整,无炎性变化。3.法舒地尔干预组BAL液中IL-4、IL-5、IL-17、Eotaxin含量比哮喘组明显降低,且均有统计学意义(P<0.05),两个对照组含量最低,各组间IFN-g含量无明显差异(P>0.05)。4.肺组织实时荧光定量PCR检测结果同样显示法舒地尔干预组IL-4、IL-17、Eotaxin、Gob-5的m RNA表达水平显著低于哮喘组(P<0.05)。各组间IFN-g的m RNA表达水平无明显差异(P>0.05)。5.流式分析提示法舒地尔干预组Th2、Th17细胞数量百分比较哮喘组低(P<0.05),Treg细胞数量增加(P<0.05),各组间Th1细胞数目无明显变化(P>0.05)。6.以上结果在两个对照组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1.新构建的HDM哮喘模型具有简单易行、实验时间短、重复性好等优点。2.法舒地尔可以通过抑制气道炎症细胞及相关细胞因子、趋化因子的产生从而降低HDM诱导的过敏性气道炎症性反应,减轻肺组织炎症性病理改变,减少支气管黏液分泌。同时法舒地尔在30mg/kg剂量下对小鼠无明显副作用,提示法舒地尔可以开发为治疗过敏性哮喘,特别是重症哮喘的新药这一广阔前景。3.抑制Rho A-ROCK信号通路伴随着Th17细胞数量及其效应因子IL-17表达水平降低。提示Rho A-ROCK信号通路可能通过调节Th17细胞从而在过敏性哮喘中发挥作用,本研究为过敏性哮喘和其它炎症性疾病的发病机制与治疗提供了新思路。