玫瑰（Rosa rugosa）是蔷薇科（Rosaceae）蔷薇属落叶丛生灌木,气味芳香、花色艳丽、含精油量高,具有很好的经济价值,也是我国重要的观赏植物。‘娇媚三变’玫瑰（R.rugosa‘Jiaomei Sanbian’）是本课题组通过远缘杂交获得的新品种,是第一个变色玫瑰品种,开花后花色由深粉渐变为浅粉色,具有很高的观赏价值和经济价值。但因扦插成活率极低、枝条多刺不便于嫁接,使得‘娇媚三变’难以大规模繁殖,限制了其推广和应用,因此需要建立起组培快繁体系以满足规模化生产的需要。本试验采用‘娇媚三变’玫瑰带腋芽茎段和幼嫩叶片作为外植体,对其组织培养进行了系统的研究,目的是为了构建适合工厂化生产繁殖的‘娇媚三变’微体快繁体系;同时对其胚性愈伤组织的发生和再生体系的构建进行了初步的探索。本试验的研究结果主要如下:1.‘娇媚三变’玫瑰快繁体系的建立本试验采用‘娇媚三变’玫瑰的带芽茎段作为外植体,对其组织培养过程中的外植体消毒与启动、增殖培养、生根培养与炼苗移栽等环节进行了研究,筛选出最佳的培养基配方。试验研究结果表明:4-5月份春季生长期是最佳的取材时期,污染率最低为5%,萌发率可以达到80%。春季生长期和冬季休眠期茎段最佳灭菌处理均为75%酒精30 s+0.1%Hg Cl2 20 min;夏季生长期茎段最佳灭菌处理为75%酒精2 min+0.1%Hg Cl2 15min;最佳增殖培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA+0.8 mg/L GA3,增殖系数达到4.54;对组培苗进行纯MS培养基的复壮培养后,再接种于最佳生根培养基:1/2MS+0.1 mg/L NAA,生根率达到87.44%,而不经过复壮直接生根培养得到的生根率为79.68%;最佳栽培基质为草炭:蛭石:珍珠岩=1:1:1,移栽成活率达到91.21%。2.‘娇媚三变’玫瑰再生体系的初步研究试验选取玫瑰品种‘娇媚三变’组织培养过程中的组培苗叶片、叶柄作为外植体来诱导玫瑰的愈伤组织,对‘娇媚三变’的再生体系进行初步探究。研究了外植体、其他添加剂、植物生长调节物质和培养条件对玫瑰愈伤组织诱导和再生的影响。研究结果表明:在暗培养条件下,玫瑰的组培苗叶片在添加适量2,4-D和1.0 mg/L 6-BA的MS培养基上培养,可以诱导出非胚性愈伤组织,诱导率可达到100%;用玫瑰组培苗的叶片和叶柄,在培养基MS+4.0mg/L 2,4-D+10mg/L Ag NO3+400mg/L L-p中暗培养,可以产生胚性愈伤组织并成功分化出再生芽。其中,纯叶柄胚性愈伤组织诱导率最高,为97.42%;胚性愈伤组织最佳增殖培养基为MS+1.5mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA;胚性愈伤组织最佳分化培养基为MS+6.0mg/L 2,4-D+10mg/L Ag NO3+400mg/L L-p,分化率为70.50%。研究还发现,将非胚性愈伤切成3 mm以下组织块置于分化培养基MS+6.0mg/L 2,4-D+10mg/L Ag NO3+400mg/L L-p,可诱导出胚性愈伤组织,培养30 d左右有绿色芽点出现,并分化出健康再生芽。