马铃薯磷转运蛋白相关基因StPHT1

来源 :西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gift19852003
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植物吸收和转运土壤中的磷依靠根系细胞膜上的磷转运蛋白。植物中已发现的磷转运蛋白基因分为6个家族:PHT1、PHT2、PHT3、PHT4、PHT5、PHO1,不同亚家族磷转运蛋白对植物的生长发育起到不同作用。大多PHT1家族基因被判断为高亲和磷转运蛋白基因,在各种作物中均有较为深入的研究。但PHT1家族在马铃薯中的研究目前仍较少,值得进行研究补充。研究在马铃薯PHT1家族中组织表达量最高的StPHT1;7,可以探究其对马铃薯生长发育以及抗逆相关方面的重要作用。
  本研究从马铃薯栽培品种Desiree中克隆获得StPHT1;7基因,构建StPHT1;7基因的过表达和干扰载体,进行马铃薯遗传转化,观察分析StPHT1;7基因对马铃薯生长发育起到的作用以及抗逆方面带来的影响。主要研究结果如下:
  (1)用生物信息学方法,在马铃薯基因组中鉴定出8个PHT1家族基因,PGSC转录组数据分析表明,StPHT1;7在马铃薯全株表达量均很高,受各种胁迫影响后表达量显著提升。
  (2)用cDNA序列PCR克隆了StPHT1;7基因,StPHT1;7基因全长1614bp。构建了StPHT1;7基因过表达和干扰载体,用农杆菌转化法进行马铃薯遗传转化,通过筛选抗性植株,检测基因表达量,鉴定转基因植株,得到了表达量为对照2-7倍的过表达株系和表达量为对照0.3%-1%的沉默株系。
  (3)对转基因植株的生理指标进行观察,发现过表达株系和沉默株系在株高、根长、叶面积大小等方面的差异。过表达株系长势明显比强于野生型,沉默株系长势明显弱于野生型。
  (4)对转基因植株进行磷胁迫处理,发现在无磷条件下过表达株系根系较野生型发达,根长显著高于野生型约2.6倍,沉默株系根长显著低于野生型约为0.6倍。对转基因植株进行PEG模拟干旱胁迫和自然干旱胁迫处理,发现过表达株系、沉默株系和野生型之间的抗旱性能力有显著差异。抗旱性能力强弱顺序依次为野生型、过表达株系、沉默株系。
  (5)在盐胁迫下,马铃薯过表达和沉默株系试管苗的表型与野生型没有显著差异。在29℃高温胁迫下诱导试管薯,马铃薯过表达和沉默株系较常温下诱导的结薯率,结薯速度均下降,与野生型相比差异不显著。StPHT1;7基因在盐胁迫下不影响马铃薯植株的抗逆性,StPHT1;7基因在热胁迫下对马铃薯试管薯的诱导无显著影响。
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