双斑侧沟茧蜂(Microplitisbicoloratus)是农业害虫斜纹夜蛾(Spodoptera litura)的天敌,通过寄生斜纹夜蛾幼虫而抑制寄主血细胞的免疫反应及寄主的生长发育。亲环素D(Cyclophilin D,CypD)属于亲环素蛋白家族,研究表明,哺乳细胞在受到凋亡刺激时,CypD可与p53结合形成复合物,通过线粒体途径诱导细胞凋亡。为探讨茧蜂寄生斜纹夜蛾过程中,茧蜂病毒诱导寄主血细胞凋亡以抑制其细胞免疫的分子机制,本研究通过凋亡检测、western blot、Co-IP、免疫荧光、基因沉默和线粒体膜电位检测等实验检测了寄生前后及茧蜂病毒感染后CypD与p53的表达、互作、细胞凋亡及线粒体变化情况。结果显示,茧蜂的寄生导致斜纹夜蛾幼虫血细胞p53、CypD上调及促进CypD与p53相互作用,线粒体膜电位的下降,细胞色素C从线粒体释放,激活了 cl-caspase 3,且寄生导致寄主血细胞凋亡的增加。提取茧蜂病毒MbBV感染Spli221细胞24h后,MbBV感染促进了 CypD与p53相互作用,细胞内线粒体膜电位的下降,细胞色素C从线粒体释放,激活了 cl-caspase 3同时也伴随着细胞凋亡增加。而当用RNAi沉默斜纹夜蛾幼虫血细胞CypD可以挽救茧蜂寄生引起的寄主血细胞凋亡。同时,当用CsA抑制或siRNA沉默CypD时,发现,抑制或沉默CypD可以抑制CypD与p53相互作用,细胞内线粒体膜电位有一定的恢复;且CsA抑制或沉默CypD后,细胞凋亡率显著性下降。以上结果提示,MbBV可能通过促进CypD与p53相互作用来诱导细胞凋亡的发生。综上所述,本研究阐明了双斑侧沟茧蜂寄生促进了寄主血细胞CypD与p53相互作用,导致线粒体膜电位下降,细胞色素C从线粒体释放,激活cl-caspase 3,最终导致寄主血细胞凋亡。该研究为阐明茧蜂寄生抑制寄主斜纹夜蛾免疫反应的分子机制奠定了一定的理论基础,也为生物防治斜纹夜蛾提供新的研究靶点。