背景和目的：重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis, SAP)是一种发病急、进展快、并发症多、病死率高的临床严重疾病。全身炎性反应综合征（systemicinflammatory response syndrome, SIRS）是SAP发展至多器官功能障碍综合征（multiple organs dysfunction syndrome, MODS）的前期表现，是其高病死率的主要原因。过度的炎性反应可导致机体免疫功能下降，器官感染、功能受损等，进而导致并发症发生率明显升高[1,2]，进一步加重SAP病情的发展，形成恶性循环。因此，阻断SIRS向MODS的进展是降低SAP高病死率的关键。多形核中性粒细胞（polymorphonuclear neutrophils, PMN），是炎症反应的重要效应细胞，在炎症的发生、发展和转归中起着关键的作用[3]。PMN凋亡障碍或延迟是SIRS的主要病理生理过程。钙离子作为人体内最普遍的信号转导因子之一，调节着许多细胞和组织的生理活动，其稳态失衡是细胞凋亡的关键环节之一。本实验旨在SAP所致的SIRS大鼠模型中，研究PMN细胞内及线粒体内钙离子浓度变化，并进一步探讨大黄素（Emodin）和地塞米松（Dexamethasone）对其的影响及作用机制，以确定钙稳态是否为大黄素和地塞米松的治疗靶点，为其临床治疗SAP提供理论依据。方法：采用经十二指肠乳头逆行胆胰管注射1.5%脱氧胆酸钠溶液的方法制备重症急性胰腺炎SIRS大鼠模型。第一阶段：分组及模型制备：将健康SD大鼠随机分组，即A组（假手术组）、B组（重症急性胰腺炎SIRS模型对照组）、C组（Emodin干预组：C1组干预终浓度为1ug/ml； C2组干预终浓度为5ug/ml；C3组干预终浓度为10ug/ml），每组10只；体外干预实验：造模24小时后，采取外周血分离中性粒细胞，然后根据实验要求分别进行药物干预，A组（生理盐水）、B组（生理盐水）、C1（Emodin干预终浓度为1ug/ml）、C2（Emodin干预终浓度为5ug/ml）、C3（Emodin干预终浓度为10ug/ml）。收集药物干预24小时后的PMN，检测各组的PMN凋亡率。第二阶段：分组及模型制备：将健康SD大鼠随机分为5组，即假手术组（SO组），重症急性胰腺炎SIRS模型对照组（MCO组）、地塞米松干预组（DEX组）、Emodin干预组（EMD组，干预终浓度5ug/ml,由第一阶段结果确定）、Emodin联合地塞米松干预组（EAD组），每组20只（后四组统称为重症胰腺炎SIRS模型组---SAP.SIRS组）。体外干预实验：造模24小时后，将SO组外周血分离的PMN分为2份，即假手术对照组（SOC组）和假手术钙拮抗组（SOCA组），然后根据实验要求分别进行药物干预，SOC组（生理盐水）、SOCA组（拉西地平干预终浓度1μg/L，乙醇终浓度<0.2%）、MCO组（生理盐水）、DEX组（干预终浓度为0.1umol/ml）、EMD组（干预终浓度为5ug/ml，乙醇终浓度<0.1%）、EAD组。收集药物干预24小时后的PMN，检测各组PMN凋亡率及细胞内和线粒体内钙离子浓度变化。结果：第一阶段：各组PMN凋亡百分率检测结果显示，A组PMN凋亡百分率明显高于B组（P<0.01）；C1组、C2组PMN凋亡百分率均高于B组（P<0.01），其中C2组PMN凋亡百分率明显高于C1组（P<0.05）；C3组PMN基本处于晚期凋亡或继发坏死象限。第二阶段：1、应用流式细胞技术检测各组PMN凋亡百分率（1）SO组：SOCA组细胞凋亡百分率明显低于SOC组（P<0.01）。（2）SAP.SIRS组：DEX组、EMD组、EAD组细胞凋亡百分率均高于MCO组（P<0.05），其中DEX组升高程度最小；EMD组、EAD组细胞凋亡百分率均高于DEX组（P<0.05）；EMD组与EAD组两组相比较没有显著性差异（P>0.05）。（3）SO组与SAP.SIRS组：MCO组细胞凋亡百分率明显低于SOC组（P<0.01）；EMD组、EAD组细胞凋亡百分率均高于SOC组（P<0.05）；DEX组细胞凋亡百分率低于SOC组（P<0.05）。2、应用激光扫描共聚焦显微镜检测PMN胞内钙离子浓度变化（1）SO组：SOCA组细胞内钙离子浓度明显低于SOC组（P<0.01）。（2）SAP.SIRS组：DEX组、EMD组、EAD组三组细胞内钙离子浓度较MCO组均有不同程度的升高（P<0.05），其中DEX组升高程度最小；EMD组、EAD组两组细胞内钙离子浓度均高于DEX组（P<0.05）；EMD组与EAD组两组相比较没有显著性差异（P>0.05）。（3）SO组与SAP.SIRS组：MCO组细胞内钙离子浓度明显低于SOC组（P<0.01）；EMD组、EAD组细胞内钙离子浓度均高于SOC组（P<0.05）；DEX组细胞内钙离子浓度低于SOC组（P<0.05）。3、应用激光扫描共聚焦显微镜检测PMN线粒体内钙离子浓度变化（1）SO组：SOCA组线粒体内钙离子浓度明显低于SOC组（P<0.01）。（2）SAP.SIRS组：DEX组、EMD组、EAD组三组线粒体内钙离子浓度较MCO组均有不同程度的升高（P<0.05），其中DEX组升高程度最小；EMD组、EAD组两组线粒体内钙离子浓度均高于DEX组（P<0.05）；EMD组与EAD组两组相比较没有显著性差异（P>0.05）。（3）SO组与SAP.SIRS组：MCO组线粒体内钙离子浓度明显低于SOC组（P<0.01）；EMD组、EAD组线粒体内钙离子浓度均高于SOC组（P<0.05）；DEX组线粒体内钙离子浓度低于SOC组（P<0.05）。结论：重症急性胰腺炎SIRS大鼠模型的PMN凋亡率明显低于正常大鼠，可能与PMN钙稳态失衡有关；Emodin能通过增加PMN胞内及线粒体内钙离子浓度，促进重症急性胰腺炎SIRS的PMN凋亡，抑制其凋亡延迟；地塞米松虽可增加SIRS外周血PMN胞内及线粒体内钙离子浓度，促进PMN凋亡，但效果不如Emodin；二者联合应用时，未显示出协同作用。