【摘 要】
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黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1,AFB1）,是曲霉类真菌的有毒产物。AFB1能引起机体免疫损伤、基因毒性和氧化损伤等反应。硒（Se）——必需微量元素。硒具有增强免疫,抗氧化损伤,预防突变等作用。所以本研究旨在探究摄入AFB1对雏鸡胸腺细胞周期的影响,以及亚硒酸钠对AFB1拮抗作用的机制。本研究将288只1日龄科宝肉雏鸡,平均分为对照组（硒总含量0.332mg/kg）、AFB1组（AFB1
【基金项目】
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四川省科技厅（2013FZ0072）; “教育部长江学者和创新团队发展计划”创新团队（IRT 0848）
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黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1,AFB1）,是曲霉类真菌的有毒产物。AFB1能引起机体免疫损伤、基因毒性和氧化损伤等反应。硒（Se）——必需微量元素。硒具有增强免疫,抗氧化损伤,预防突变等作用。所以本研究旨在探究摄入AFB1对雏鸡胸腺细胞周期的影响,以及亚硒酸钠对AFB1拮抗作用的机制。本研究将288只1日龄科宝肉雏鸡,平均分为对照组（硒总含量0.332mg/kg）、AFB1组（AFB1含量0.6mg/kg）、+Se组（硒总含量0.732mg/kg）、AFB1+Se组（AFB1含量0.6mg/kg,硒总含量0.332mg/kg）,饲喂对应日粮21天,每7天采样1次。通过组织病理学技术,流式细胞术,免疫组织化学技术和定量PCR（q RT-PCR）技术研究AFB1对雏鸡胸腺组织结构、胸腺细胞周期、PCNA蛋白表达水平和胸腺细胞周期相关调控基因转录水平的影响,以及硒对其拮抗作用的机制。实验结果如下:组织病理学结果:+Se组与对照组相比较,胸腺组织结构完整。AFB1组与对照组相比较,AFB1组雏鸡胸腺皮质区空白增多,细胞坏死见核碎片增多;胸腺髓质区淤血。AFB1+Se组与AFB1组相比较,AFB1+Se组胸腺组织结构清晰,未见明显病理损伤,同时AFB1+Se组与对照组相比较,胸腺组织结构完整。流式细胞术检测G0/G1期细胞数量分布的百分比结果:+Se组与对照组相比较,各日龄差异不显著（P>0.05）。与对照组比较,各日龄,AFB1组显著或极显著升高（P<0.01或P<0.05）。与AFB1组相比较,在14和21日龄时,AFB1+Se组显著降低（P<0.05）;同时,AFB1+Se组与对照组相比较,各日龄差异不显著（P>0.05）。免疫组织化学检测PCNA蛋白积分光密度值（IOD）结果:+Se组与对照组相比较,在7和14日龄时,差异不显著（P>0.05）。与对照组比较,各日龄,AFB1组显著或极显著降低（P<0.01或P<0.05）。与AFB1组相比较,在7和14日龄时,AFB1+Se组显著升高（P<0.05）;同时,AFB1+Se组与对照组比较,在7和14日龄时差异不显著（P>0.05）。定量PCR检测周期相关基因转录水平结果:+Se组与对照组相比较,AT1M、p53、p21、p16、Cyclin E、Cdk6、Cdk2和PCNA基因在各日龄时,p27基因在21日龄时,p15和C1yclin D1基因在7和14日龄时,差异不显著（P>0.05）。与对照组相比,ATM、p53、p15和p16基因在各日龄时,p21基因在7和21日龄时,p27基因在21日龄时,AFB1组均显著或极显著升高（P<0.01或P<0.05）;Cyclin D1、Cyclin E、Cdk6和Cdk2基因在7和14日龄时,PCNA基因在各日龄时,AFB1组均显著或极显著降低（P<0.01或P<0.05）。与AFB1组比较,ATM和p21基因在7和21日龄时,p53、p15和p16基因在各日龄时,p27基因在21日龄时,AFB1+Se组显著或极显著降低（P<0.01或P<0.05）;Cyclin D1和Cyclin E基因在7和14日龄时,Cdk6和Cdk2基因在7日龄时,PCNA基因在个日龄时,AFB1+Se组显著或极显著升高（P<0.01或P<0.05）。与此同时AFB1+Se组与对照组相比较,ATM、p53、p27、Cdk2和PCNA基因在各日龄时,p21、p15、p16和Cyclin D1基因在7和14日龄时,Cyclin E基因在7和21日龄时,Cdk6基因在7日龄时,差异不显著（P>0.05）。综上所述,摄入0.6mg/kg AFB1可通过p15（p16）-Cyclin D1/Cdk6通路,p27-Cyclin E/Cdk2通路,和ATM-p53-p21-Cyclin E/Cdk2（PCNA）通路,致使胸腺细胞G0/G1期周期阻滞,而日粮中添加亚硒酸钠能减轻AFB1对上述几条通路的影响,而这可能是AFB1引起雏鸡胸腺细胞G0/G1期阻滞以及硒对其拮抗作用的分子机理。
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