顺铂是一种非特异性化疗药物,但顺铂急性肾损伤是顺铂剂量限制性毒性,因此,降低顺铂造成的肾损伤在顺铂临床应用中尤为重要。知柏地黄丸是一种具有“滋阴降热”作用的中成药,目前,在临床上,它也被用于治疗各种肾脏疾病。本论文拟研究知柏地黄丸对顺铂急性肾损伤的预防治疗作用,并探究其潜在的作用机制。本实验通过网络药理学对知柏地黄丸预防治疗顺铂急性肾损伤的能力进行初步预测,并分析可能的主要活性成分、作用靶点和相关机制。随后,在细胞和动物水平建立顺铂急性肾损伤模型,对知柏地黄丸的预防作用进行验证,并探究潜在的作用机制。网络药理学结果初步筛选出知柏地黄丸有22种活性化合物,和226个潜在靶点。顺铂诱导的急性肾损伤相关的基因靶点有498个。两者靶点交集获得40个重复靶点,可能是知柏地黄丸防治顺铂诱导的急性肾损伤的潜在靶点,其中核心靶点包括CASP3、VEGFA、IL6等。随后进行富集分析,获得339条GO条目与64条KEGG通路,主要作用机制可能包括DNA复制、I-κB/NF-κB通路、外在凋亡通路等。在实验验证部分,选择25μM顺铂对HK-2细胞和293T细胞作用24 h建立体外顺铂肾损伤模型,结果表明,知柏地黄丸能够降低顺铂对HK-2细胞和293T细胞的细胞毒性,同时对细胞凋亡、活性氧的产生具有缓解作用。而且,在A549细胞、HCT116细胞核MCF7细胞中知柏地黄丸不影响顺铂的抗肿瘤作用,在肺癌A549细胞中有轻微的协同抗肿瘤作用。在大鼠模型中,10mg/kg顺铂造成大鼠肾脏指数升高,血清肌酐、血尿素氮浓度水平升高,肾脏组织病理学结构受损,与模型组相比,知柏地黄丸组大鼠相关指标均得到明显缓解,表明知柏地黄丸可以减轻顺铂诱导的急性肾损伤。顺铂导致大鼠肾脏组织中MDA水平升高,SOD活性下降和GSH含量减少,在知柏地黄丸的作用下,逆转了氧化指标的变化情况,表明知柏地黄丸可以缓解顺铂诱导的氧化应激。Western Blot实验结果显示顺铂组大鼠cl-Caspase3表达上调,在知柏地黄丸作用下cl-Caspase3表达下调,表明知柏地黄丸能够减轻顺铂诱导的细胞凋亡。同时,Western Blot实验结果显示顺铂组大鼠炎症反应指标p-p65表达上调,在知柏地黄丸作用下p-p65表达下调,表明知柏地黄丸能够减轻顺铂诱导的炎症反应。在作用机制方面,通过Western Blot实验进行验证,顺铂会导致HK-2细胞和293T细胞相关蛋白水平改变:抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调,促凋亡蛋白Bax、Bcl-x L表达上调,Caspase3活化增加,炎症指标NF-κB p65磷酸化水平升高,MAKP通路蛋白JNK、p38 MAPK、Erk 1/2磷酸化水平升高,而知柏地黄丸能够缓解蛋白水平的失调,使恢复到一个相对正常的表达水平,证明知柏地黄丸防治顺铂急性肾损伤作用机制主要涉及MAPK通路、NF-κB通路和细胞外在凋亡通路,证明知柏地黄丸可通过多种细胞信号通路发挥防治顺铂导致的急性肾损伤的作用。本研究通过网络药理学对知柏地黄丸防治顺铂诱导的急性肾损伤的潜力进行预测,并通过基础实验对药效学基础和作用机制进行验证探究,证明知柏地黄丸有望成为预防治疗顺铂诱导的急性肾损伤的潜在候选药物,为知柏地黄丸的临床应用提供了科学依据。