紫甘薯花青素双水相提取工艺及酒精性肝损伤预防效果研究

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紫甘薯富含花青素,研究发现花青素具有许多生理功能,如抗氧化性、提高记忆力、改善视力和保肝等。本研究以紫甘薯为原料,响应面优化紫甘薯花青素的双水相提取工艺,并对其急性、亚急性酒精性肝损伤预防效果及降解动力学进行研究,研究意义在于提升紫甘薯的附加值,为紫甘薯花青素作为抗氧化和保肝功能的产品提供理论支撑。采用响应面法研究紫甘薯花青素的双水相提取工艺。在单因素试验的基础上,通过Box-Benken试验探讨了乙醇质量分数、硫酸铵质量分数、液固比、溶液pH值、提取温度和提取时间对紫甘薯花青素分配系数和提取率的影响,得到了紫甘薯花青素提取的最佳工艺为液固比45:1(mL/g),乙醇质量分数27%(w/w),硫酸铵质量分数22%(w/w),pH值3.4,时间20min,温度25℃,此条件下制备的紫甘薯花青素的提取率和分配系数分别为90.02%和19.62,与理论预测值无显著性差异(P>0.05),说明模型可以预测实践中花青素的提取过程。HPLC-ESI-MS/MS分析结果表明,紫甘薯花青素主要是被咖啡酸、阿魏酸、对羟基苯甲酸酰化的芍药型和矢车菊型花青素。通过建立急性酒精性肝损伤动物模型,系统探讨了紫甘薯花青素对小鼠解酒及急性酒精性肝损伤的影响。结果表明,紫甘薯花青素对雄性C57BL/6J小鼠具有一定的解酒作用;与模型组相比,紫甘薯花青素干预可降低因酒精摄入而导致的血清天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、乙醛脱氢酶(LDH)和肝脏乙醇脱氢酶(ADH)活力的升高及肝脏总胆固醇(TCH)、甘油三酯(TG)和丙二醛(MDA)含量的增加,提高肝脏超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽转移酶(GST)的活力;组织病理学分析结果表明,提前摄入紫甘薯花青素可阻止酒精导致的肝脏肿大。总之,紫甘薯花青素具有一定的解酒和保护急性酒精性肝损伤的作用。我们研究了紫甘薯花青素亚急性酒精性肝损伤的作用。结果表明,与模型组相比,紫甘薯花青素显著降低血清中AST、ALT、LDH和肝脏中ADH的活性(P<0.01);降低肝脏中MDA的含量,提高SOD和GST的活力水平,病理分析表明紫甘薯花青素可以改善亚急性酒精性肝损伤。我们的研究结果表明,紫甘薯花青素是良好的抗氧化剂,可以减弱酒精导致的氧化应激及脂质过氧化,对C57BL/6J小鼠血清和肝脏具有保护作用。采用经典的恒温法对紫甘薯花青素在不同储存溶剂(去离子水、10%乙醇、20%乙醇、50%乙醇)中的降解动力学进行研究。通过数学拟合,紫甘薯花青素在不同储存溶剂中的降解符合一级反应动力学规律。通过Arhenius方程和Eyring-Polanyi模型计算出反应活化能、焓值和熵值,乙醇浓度为0%、10%、20%、50%时,反应活化能(Ea)分别为83.46、78.53、78.09、75.33kJ/mol,焓值(ΔH)分别为77.33、72.41、71.97、69.21kJ/mol/K,熵值(ΔS)分别为180.81、188.37、189.94、193.57J/mol/K。
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