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随着人们生活水平的不断提高，食品安全问题越来越受到人们的关注。一定剂量的盐酸克伦特罗喂养动物以后能够明显增加动物的瘦肉率，因此受到不良商家的追捧。人在食用了含有盐酸克伦特罗的肉及肉制品后会出现不同程度的中毒情况，严重的可导致死亡。酶联免疫吸附检测技术(ELISA)在检测盐酸克伦特罗残留方面具有可定量、灵敏度高、操作方便等优点。抗体制备是ELISA检测方法建立中的关键。传统的多克隆抗体制备虽然简单，但抗体纯度不够高，特异性差，易发生交叉反应。而单克隆抗体生产成本高、生产周期长、操作繁琐、技术难度高，需要真核细胞进行表达。纳米抗体是来源于骆驼科动物体内重链抗体的最小的完整功能性抗原结合片段，分子质量仅为15KDa，具有亲和力高、稳定性好、筛选周期短、易于耦合成多价抗体等优点。本实验首先采用重氮法合成了OVA与CL偶联比为1：28.7的完全抗原。通过rProteinA对兔抗盐酸克伦特罗的多克隆抗体进行了纯化，纯化后的抗体效价为1:80000，浓度为0.667mg/mL，用于盐酸克伦特罗ELISA检测方法的建立其特异性有所提高。采用合成的完全抗原和亲和纯化后的抗体建立CL的ELISA检测方法，通过对合成抗原包被浓度、一抗工作浓度、封闭液工作浓度等条件的优化，最终检测灵敏度可以达到6.4ng/mL。最后利用噬菌体展示技术，从天然的纳米抗体噬菌体文库中筛选盐酸克伦特罗的纳米抗体，经过三轮“吸附-洗脱-扩增”、ELISA阳性鉴定后，从96个单菌落中挑选出了3株阳性克隆。本课题最终有望为ELISA检测盐酸克伦特罗残留提供一种新的效价高、稳定性好、成本低的小分子抗体。