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目的：已往实验证明，预先给予短暂的、轻微的、不至于引起神经元损伤的脑缺血预处理，使神经元能够耐受其后通常会引起神经元损伤的比较严重的脑缺血，这种现象被称为脑缺血耐受。自1990年首先由Kitagawa提出以来，已有大量实验证明它的存在，但其发生机制至今尚未阐明。丝裂原活化蛋白激酶家族（Mitogen-activated protein kinase, MAPKs）是一类广泛存在于细胞内的含有丝氨酸/苏氨酸残基的蛋白激酶。p38MAPK是MAPKs家族的成员之一，近年来大量的实验证实，MAPK信号传导通路与脑缺血损伤关系密切，并且可能在脑缺血耐受诱导过程中发挥重要作用。我们的前期研究已经证实，脑缺血预处理能够引起p-p38MAPK的上调。本实验在此基础上，进一步观察脑缺血预处理诱导脑缺血耐受过程中，p-p38MAPK表达的细胞类型及变化规律。方法：健康雄性Wistar大鼠（280～320g）108只，首先永久性凝闭椎动脉，恢复两天后，随机分为以下四组（n=27）：1sham组：暴露双侧颈总动脉，但不阻断血流。2CIP组：先夹闭双侧颈总动脉3min，再恢复血流再灌注。3损伤性缺血（ischemic insult, II）组：夹闭双侧颈动脉8min，再恢复血流再灌注。4CIP+II组：先夹闭双侧颈总动脉3min作为脑缺血预处理，再灌注两天后，夹闭双侧颈总动脉8min作为损伤性缺血，然后恢复再灌注。各组都选取9个时间点，分别是假手术后或末次缺血后的0min、30min、3h、6h、1d、2d、4d和7d（每个时间点n=3）。在规定时间点，断头取脑组织，通过硫堇染色对大鼠海马CA1区神经元进行神经病理学评价；应用荧光免疫组织化学染色法(immunofluorescence)观察p-p38MAPK蛋白以及星形胶质细胞的特异性标记物神经胶质纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein, GFAP)的表达，观察脑缺血耐受诱导过程中p-p38MAPK蛋白在大鼠海马CA1区星形胶质细胞中的表达及变化。应用人工计数法，每只动物选取3张切片于高倍镜下计数相同部位p-p38MAPK蛋白在星形胶质细胞表达的细胞个数，每个时间点计数3只动物的切片，计算p-p38MAPK蛋白表达阳性的星形胶质细胞数量的平均值。结果：1神经病理学评价通过硫堇染色观察到，sham组大鼠脑组织海马CA1区椎体神经元细胞排列致密、整齐为2~3层，细胞形态完整无缺失，核仁清晰，胞核饱满。CIP组在各时间点CA1区椎体神经元细胞均未见明显损伤ND无显著差异（P＞0.05）。II组在2d时间点CA1区椎体神经元细胞偶见浓缩、深染；4d时间点可见几乎全部神经元胞体皱缩变小，核固缩、深染、形状不规则，即神经元发生了明显的迟发性死亡；7d椎体神经元细胞几乎全部缺失。4d时间点和7d时间点ND均显著降低（P＜0.05)。CIP+II组在各时间点CA1区椎体神经元细胞排列致密、整齐、胞核饱满、核仁清晰。与II组相比7d时， ND为182.24±10.76、显著升高（P＜0.05)。2p-p38MAPK蛋白在大鼠海马CA1区星形胶质细胞中的表达及变化荧光双标显示，在0min时间点sham、CIP、II以及CIP+II组的星形胶质细胞均有一定量的p-p38MAPK蛋白的表达，与sham组相比，CIP组和II组p-p38MAPK蛋白在星形胶质细胞中的表达均无显著变化（P＞0.05）。与II组相比，CIP+II组大鼠海马CA1区表达p-p38MAPK蛋白阳性的星形胶质细胞个数明显增加（P＜0.05)，每个星形胶质细胞表达的p-p38MAPK数量也较大。与此同时，GFAP染色显示CIP+II组的星形胶质突起增多、丰富，呈现激活状态，与神经元结合紧密。在30min时间点，与sham组相比，CIP组p-p38MAPK蛋白表达阳性的星形胶质细胞无明显变化（P＞0.05）。但CIP组的星形胶质细胞突起明显增多。与sham组相比，II组p-p38MAPK蛋白在星形胶质细胞的表达无明显变化（P＞0.05)。与II组相比，CIP+II组大鼠海马CA1区表达p-p38MAPK蛋白阳性的星形胶质细胞个数明显增加（P＜0.05)，并且星形胶质细胞突起增多、丰富，呈现激活状态，与神经元结合紧密。在6h时间点，与sham组相比，CIP组p-p38MAPK蛋白表达阳性的星形胶质细胞个数明显增加（P＜0.05)；II组p-p38MAPK蛋白表达阳性的星形胶质细胞的个数无明显变化（P＞0.05）。与II组相比，CIP+II组p-p38MAPK蛋白表达阳性的星形胶质细胞个数明显增加（P＜0.05)，每个星形胶质细胞表达的p-p38MAPK数量明显增多。在2d时间点，与sham组相比，CIP组p-p38MAPK蛋白表达阳性的星形胶质细胞个数明显增加（P＜0.05)，且每个星形胶质细胞表达的p-p38MAPK数量明显增多；II组p-p38MAPK蛋白表达阳性的星形胶质细胞的个数无明显变化（P＞0.05）。与II组相比，CIP+II组p-p38MAPK蛋白表达阳性的星形胶质细胞个数明显增加（P＜0.05)，每个星形胶质细胞表达的p-p38MAPK数量变化不明显。在7d时间点，与sham组相比，CIP组p-p38MAPK蛋白表达阳性的星形胶质细胞个数明显增加（P＜0.05)，但星形胶质细胞细胞突起短小；II组p-p38MAPK蛋白表达阳性的星形胶质细胞的个数无明显变化（P＞0.05），但星形胶质细胞形态不清晰。与II组相比，CIP+II组p-p38MAPK蛋白表达阳性的星形胶质细胞个数明显增加（P＜0.05)。结论：脑缺血预处理引起p-p38MAPK蛋白在星形胶质细胞的表达量增加。