目的探讨睫状神经营养因子(CNTF)联合视黄酸(RA)诱导成肌细胞类神经分化的可能性以及此诱导过程与神经元限制性沉默因子(REST)相关性。方法以CNTF诱导C2C12去分化,再以RA诱导C2C12类神经分化。实验分组及处理方式:诱导组(含CNTF培养基诱导去分化3天+含RA培养基诱导类神经分化2天+神经细胞培养基3天);对照组(不含CNTF培养基诱导3天+不含RA培养基诱导2天+神经细胞培养基3天)。通过细胞形态学、细胞免疫荧光、流式细胞分析、Western blot等技术对去分化及类神经分化的细胞进行鉴定及相关分析,比较细胞类神经分化前后REST表达变化。结果联合诱导后细胞聚集呈“团簇样”生长,部分团块可悬浮生长,为典型的“神经球”样表现。细胞免疫荧光染色显示“神经球”能够被神经特异性标记物NSE、SOX1、GFAP标记,“神经球”离散为单个细胞接种后生长状态良好,呈神经干细胞标记物(nestin)阳性表达。Western blot显示CNTF去分化诱导后成肌细胞分化相关蛋白Myogenin、P21表达明显降低;类神经分化后NSE、SOX1、GFAP表达明显增多,且成肌细胞特异性标记物Desmin及REST表达明显下降。流式细胞分析表面标记物NSE显示诱导组与对照组相比细胞存在明显差异,且诱导组NSE标记的阳性细胞率达84%左右。结论CNTF联合RA可诱导成肌细胞类神经分化,且该诱导过程可能与REST表达降低相关。