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背景与目的随着发病率和死亡率的增加,癌症已成为中国的主要公共卫生问题之一,其中结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是最常见的消化道肿瘤之一,由于其早期临床特征的隐匿性导致大多数CRC被发现时已处于疾病的中晚期,患者预后一般较差,因此,寻找有效、便捷的生物标记物对CRC进行筛查和预后判断是现在临床上亟待解决的一个问题。目前,对于CRC分子病理机制的研究主要集中在以下三方面:染色体不稳定(chromosomal instability,CIN)、CpG 岛甲基化表型(CpG island methylator phenotype,CIMP)以及微卫星不稳定(microsatellite instability,MSI)。其中MSI是指错配修复基因在CRC发生过程中发生突变,导致MMR功能缺陷,诱导细胞凋亡障碍最终形成肿瘤的过程。CIMP主要指DNA异常甲基化引起原癌基因异常激活及抑癌基因失活等改变,与肿瘤和某些遗传病的发生关系密切。为了探究上述途径在CRC进展过程中发挥的作用,本研究选择在CRC中发生CpG岛高甲基化改变的抑癌基因SEPT9、SFRP1的蛋白产物Septin9、SFRP1。以及MSI过程中出现基因启动子甲基化沉默的MMR的蛋白产物MLH1和MSH2。本课题通过检测MMR蛋白、Septin9及SFRP1蛋白在正常结肠上皮、腺瘤性息肉及CRC组织中的表达情况,分析上述蛋白在CRC发生、发展及预后中的价值。同时提高临床服务的有效性,尤其是对于农村或经济条件欠发达地区的人群,降低CRC的死亡率及家庭、社会的负担。材料与方法本研究为回顾性研究,选取郑州大学第二附属医院病理科2012年7月至2016年7月期间留存的138例CRC、48例高级别腺瘤和31例低级别腺瘤病理标本,以腺瘤或癌细胞旁的正常肠黏膜上皮作为内对照。采取免疫组织化学法检测细胞中Septin9、SFRP1、MLH1和MSH2蛋白的表达情况,同时对入组患者进行随访,采用SPSS25.0软件进行统计学分析。结果1.甲基化标志物在CRC、腺瘤性息肉中的表达情况:①Septin9蛋白在CRC组织中阴性表达率为64.49%(89/138);在高级别腺瘤组中阴性表达率为56.25%(27/48);在低级别腺瘤组中阴性表达率为38.71%(12/31)。②SFRP1蛋白在CRC组织中阴性表达率为58.68%(81/138);在高级别腺瘤组中阴性表达率为58.33%(28/48);在低级别腺瘤组中阴性表达率为35.48%(11/31)。2.甲基化标志物与CRC临床病理特征的关系:Septin9蛋白阴性表达的患者更多见于高龄、肿瘤直径≥5cm、肿瘤分化较差的患者;SFRP1蛋白阴性表达的患者更多见于高龄、肿瘤直径≥5cm、肿瘤分化较差以及Duke分期较高的患者。3.MMR蛋白在CRC、腺瘤性息肉中的表达情况:①MLH1蛋白在CRC组中表达缺失率13.77%(19/138);在高级别腺瘤组中表达缺失率10.42%(5/48);在低级别腺瘤组中表达缺失率6.45%(2/31)。②MSH2蛋白在CRC组中表达缺失率5.80%(8/138);在高级别腺瘤组中表达缺失率4.17%(2/48);在低级别腺瘤组中表达缺失率6.45%(2/31)。4.MMR表达状态与CRC临床病理特征的关系:MLH1蛋白表达缺失的患者更多见于肿瘤位于近端结肠以及粘液腺癌的患者,而MSH2蛋白表达缺失的患者更多见于右半结肠癌的患者。5.Septin9、SFRP1、MLH1和MSH2蛋白表达情况与CRC患者预后的关系甲基化标志物Septin9和SFRP1蛋白阴性表达者生存率明显低于阳性表达者,MMR蛋白表达缺失患者生存率与阳性表达者无明显差异。6.Septin9、SFRP1、MLH1和MSH2双阴性表达情况与CRC患者预后的关系Septin9/SFRP1双阴性表达者生存率明显低于阳性表达者,Septin9/MLH1、Septin9/MSH2、SFRP1/MLH1、SFRP1/MSH2 及 MLH1/MSH2 双阴性表达者生存率与阳性表达者均无明显差异。结论1.在结直肠息肉发展至CRC过程中,Septin9和SFRP1蛋白可以作为预测腺瘤癌变的早期指标,且与CRC生存率呈正相关。2.在CRC中MLH1及MSH2蛋白表达缺失对患者预后无明显影响。