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目的:以THP-1细胞构建的人类巨噬细胞源性泡沫细胞模型为研究对象,并进一步探讨具有内在拟交感活性的β肾上腺能受体阻滞剂醋丁洛尔和无内在拟交感活性的β肾上腺能受体阻滞剂美托洛尔,对人类巨噬细胞源性泡沫细胞模型功能影响的差别,从理论上探讨两种不同β受体阻滞剂在临床应用中出现不同疗效的原因。 方法:(1)以佛波酯和氧化型低密度脂蛋白诱导人的急性单核细胞白血病细胞株( THP-1细胞株),建立经典公认、稳定可靠的人类巨噬细胞源性泡沫细胞模型。(2)建立异丙肾上腺素组、美托洛尔+异丙肾上腺素组、醋丁洛尔+异丙肾上腺素组,根据实验目的分别用不同浓度梯度的异丙肾上腺素、美托洛尔、醋丁洛尔处理THP-1细胞,从而形成相关组别的亚组。(3)应用Western Blot技术检测各组THP-1细胞CCR2表达量的变化。应用ELISA技术检测各组THP-1细胞MCP-1的量的变化。利用Transwell小室检测不同药物处理后THP-1细胞的迁移能力变化。 结果: (1)以佛波酯和氧化型低密度脂蛋白诱导人的急性单核细胞白血病细胞株(THP-1细胞株),建立了经典公认、稳定可靠的人类巨噬细胞源性泡沫细胞模型。 (2) Western Blot实验结果表明:1)异丙肾上腺素组:异丙肾上腺素处理的THP-1细胞,CCR2的表达水平显著高于空白对照组(P<0.05),且浓度越高,CCR2表达量越大,呈浓度依赖性;2)美托洛尔组:THP-1细胞经美托洛尔处理,可以降低同浓度异丙肾上腺素升高CCR2表达的作用,且随着美托洛尔浓度的增高,阻滞异丙肾上腺素升高CCR2表达的作用越强(P<0.05),呈浓度依赖性;3)醋丁洛尔组:经醋丁洛尔预处理的THP-1细胞,再用异丙肾上腺素处理CCR2的升高与只用异丙肾上腺素刺激引起的CCR2升高,没有显著性差异。且在同浓度的异丙肾上腺素刺激时,随预处理的醋丁洛尔浓度升高,CCR2有升高趋势,但三组间无显著性差异(P>0.05)。 (3) ELISA实验结果表明:1)异丙肾上腺素组:异丙肾上腺素处理的THP-1细胞, MCP-1的水平显著高于空白对照组(P<0.05),且浓度越高,MCP-1量越大,呈浓度依赖性;2)美托洛尔组:THP-1细胞经美托洛尔处理,可以降低同浓度异丙肾上腺素升高MCP-1的作用,且随着美托洛尔浓度的增高,阻滞异丙肾上腺素升高MCP-1的作用越强(P<0.05),呈浓度依赖性;3)醋丁洛尔组:经醋丁洛尔预处理的THP-1细胞,再用异丙肾上腺素处理MCP-1的升高与只用异丙肾上腺素刺激引起的MCP-1升高,没有显著性差异。且在同浓度的异丙肾上腺素刺激时,随预处理的醋丁洛尔浓度升高,MCP-1有升高趋势,但三组间无显著性差异(P>0.05)。 (4) Transwell实验表明:1)异丙肾上腺素组:异丙肾上腺素处理的THP-1细胞,细胞迁移能力较空白对照组显著增强(P<0.05),且浓度越高,迁移能力越强,呈浓度依赖性;2)美托洛尔组:THP-1细胞经美托洛尔处理,可以降低同浓度异丙肾上腺素增强迁移能力的作用,且随着美托洛尔浓度的增高,阻滞异丙肾上腺素增强迁移能力的作用越强(P<0.05),呈浓度依赖性;3)醋丁洛尔组:经醋丁洛尔预处理的THP-1细胞,再用异丙肾上腺素处理迁移能力的增强与只用异丙肾上腺素刺激引起的迁移能力增强,没有显著性差异。且在同浓度的异丙肾上腺素刺激时,随预处理的醋丁洛尔浓度升高,迁移能力有增强的趋势,但三组间无显著性差异(P>0.05)。 结论:异丙肾上腺素能够上调THP-1细胞CCR2蛋白的表达,促进细胞MCP-1的分泌,并增强细胞的迁移能力。经美托洛尔预处理的THP-1细胞,可以阻断异丙肾上腺素的作用。而经醋丁洛尔预处理的THP-1细胞,虽然从理论上同样阻断了异丙肾上腺素对THP-1细胞的影响,但醋丁洛尔的内在拟交感活性能使THP-1细胞产生与异丙肾上腺素同样的反应。