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丁香酚是一种植物香料,带有强烈的丁香香气,具有挥发性,除用于配制化妆品香精、皂用香精以外,其药理作用广泛,可以用作镇痛剂、防腐剂及麻醉剂等等。由于其成本低廉,效果明显,在近年作为麻醉剂广泛用于水产品的运输中。目前澳大利亚、新西兰、智力等国家已将丁香酚列为没有残留期的合法活鱼运输用麻醉剂,然而,美国国家毒理学计划(NTP)发布的毒理学数据显示,丁香酚对啮齿动物是致癌物或潜在的致癌物,其安全性值得怀疑。日本肯定列表中丁香酚在水产品中的最高残留量也都有限制,并规定了丁香酚的残留限量为0.05mg/kg。世界卫生组织下的食品添加剂联合专家委员会(JECFA)在1980年发布的风险评估结果中,将丁香酚的ADI值定为2.5mg/kg(bw),而我国对于丁香酚残留方面的限制目前还处于空白阶段,因此,亟需建立检测丁香酚的高效、准确的前处理方法和定量、定性方法。本文采用固相萃取-高效液相色谱串联质谱法测定鱼肉中丁香酚的残留量。方法:将鱼肉可食部分均质处理,取样品2.00g于15mL离心管中,加入2.00g无水碳酸钠、8mL甲醇,涡旋震荡2min,超声提取10min,以10000r/min离心5min。移取提取液至另一50mL离心管中;在残渣中加入8mL甲醇,重复提取一次,合并提取液。向离心管中加入10mL正己烷脱脂,震荡离心。取下层溶液2mL,加水稀释至6mL,待C18固相萃取小柱净化处理。依次加入5 mL甲醇、5 mL水洗涤、活化小柱。将待净化的稀释液过柱,控制流速3 mL/min。用10 mL水淋洗小柱后,加入5 mL甲醇洗脱,控制流速2mL/min,收集洗脱液。40℃氮吹至近干,用甲醇定容至1ml,供LC-MS/MS分析。Waters UPLC BEH C18色谱柱(50mm×2.1mm,1.7μm);进样量5μm;柱温40℃;流速0.2ml/min;流动相A为甲醇,流动相B为0.1%氨水。负离子扫描方式(ESI-),多反应监测检测方式(MRM),毛细管电压-3.00kV、锥孔电压-20V、透镜电压0.1V、源温度110℃、去溶剂气温度350℃、去溶剂气流量650L/hr,反吹气体流量50L/hr。定性离子对为148 m/z和121m/z,定量离子148 m/z。结果表明:丁香酚标准溶液在2.0~100.0ng/mL浓度范围内,线性相关系数r=0.9986,方法检出限为2μg/kg,RSD为1.02%~2.85%,回收率在88.4%~104.7%之间。