目的 通过含药血清对甲状腺细胞进行干预,探讨益气养阴清肝散结方芪玄抑甲宁对IL-17作用后的甲状腺细胞的调控影响。方法 利用表达TSHR-A亚单位的重组腺病毒,建立雌性BALB/c小鼠的免疫GD模型,取GD模型的甲状腺组织提取甲状腺细胞进行体外原代培养,使用免疫组化法检测甲状腺球蛋白的表达以鉴定甲状腺细胞,将培养的细胞分为空白组、模型组、阳性药对照组和益气养阴清肝散结方含药血清高、中、低剂量组以及空白血清组,各给药组取相应的含药血清对甲状腺细胞进行干预后,模型组和各给药组再利用IL-17对甲状腺细胞进行作用。使用MTT法检测各组甲状腺细胞的存活率;ELISA法检测各组甲状腺细胞上清中IL-6、CXCL10的分泌;流式细胞仪检测各组甲状腺细胞中ICAM-1的表达;Real time PCR法检测各组甲状腺细胞中 IL-6、CXCL10、ICAM-1 的 mRNA 表达;Western blot 法检测各组甲状腺细胞中JNK、ERK1/2、P38以及各组细胞核中NF-κB主要亚基p65的表达;免疫荧光检测各组甲状腺细胞中NF-κB主要亚基p65的核移位情况。结果 通过对造模后小鼠血清中FT4和TRAb的变化及甲状腺组织病理学的检测,确定所造模型符合临床GD病的变化情况,可以用于后续实验研究的动物模型。通过检测甲状腺球蛋白的表达,确定所培养的细胞为甲状腺细胞,且原代培养情况良好,可作为后续实验的研究基础。离体细胞水平的实验表明,益气养阴清肝散结方对甲状腺细胞上清中IL-6、CXCL10的分泌和甲状腺细胞中ICAM-1的表达具有回调作用,对MAPK、NF-κB等细胞信号通路的相关因子也有明显的干预作用。结论 实验结果表明益气养阴清肝散结可能是通过调控Th17细胞的相关信号通路起到治疗GD的作用。本研究为GD的治疗提供了新策略,为研究和开发出疗效确切、作用机理和靶点明确的治疗GD的复方中药奠定了基础。