溶菌酶，又称细胞壁水解酶，专门作用于细菌细胞壁的骨架物质-肽聚糖，广泛存在于高等动植物组织及分泌物、原生动物、昆虫和各种微生物中。溶菌酶本身是一种蛋白质，安全性能高，在食品、医药、生物学中得到了广泛的应用。商品溶菌酶多由蛋清中提取，仅对革兰氏阳性菌有作用，限制了其应用范围，近年来国内外对多种来源的溶菌酶进行了广泛的研究，但有关海洋生物溶菌酶的研究报道较少。本文对一种新型海洋生物溶菌酶的分离纯化及理化性质进行了研究，为海洋生物溶菌酶的进一步研究和应用奠定了基础。本研究从海参肠中分离纯化溶菌酶，并测定其酶学性质及抑菌作用。首先在4℃下将海参湿肠打浆，用Tris-HCl缓冲液抽提得到含有溶菌酶的上清液。上清液经浊点萃取法(CPE)浓缩、透析、阳离子交换柱(CM52纤维素)层析和Sephadex G-75凝胶过滤层析分步纯化，最后得到电泳纯的溶菌酶制剂。实验结果表明，海参肠溶菌酶经CM52纤维素阳离子交换柱层析纯化效果最为明显，纯度提高了11.3倍，去除了大部分杂蛋白。经Sephadex G-75凝胶过滤层析柱层析纯化海参肠溶菌酶纯度提高到18.7倍。最终溶菌酶经纯化比活达到3026.1U/mg，纯度提高了18.7倍，活力回收为46.0%。最后对纯化的溶菌酶性质研究表明，该酶分子量约为16kD，对溶壁微球菌的最适作用温度为35℃，最适作用pH为6.5，在45℃以下和pH4.0～8.0之间都有较好的稳定性，并与常见金属离子和化学试剂有良好的配伍性。实验证明，与通常从蛋清中提取的溶菌酶相比较，从海参中分离纯化的溶菌酶具有广谱杀菌功能，即对常见的革兰氏阴性菌和阳性菌细胞壁均有溶解作用。