【摘 要】
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首先经反复摸索培养介质成分及培养条件,建立了简便易行的拟南芥花粉体外萌发方法.实验结果表明,Ca、K、HBO、pH等多种影响因子都对拟南芥花粉萌发和花粉管生长有显著影响.在
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首先经反复摸索培养介质成分及培养条件,建立了简便易行的拟南芥花粉体外萌发方法.实验结果表明,Ca<2+>、K<+>、H<,3>BO<,3>、pH等多种影响因子都对拟南芥花粉萌发和花粉管生长有显著影响.在所观测的实验条件范围内,培养介质中的最适Ca<2+>、K<+>、H<,3>BO<,3>的浓度分别为10、1～10、和1.6mmol/L,而最适pH约为6.0.在此条件下,将拟南芥花粉在25℃和100﹪相对湿度条件下持续培养6hr,花粉萌发率可达80﹪以上,而花粉管平均长度可达103～200μm.利用Ca<2+>通道抑制剂（La<3+>或Gd<3+>）或微丝解聚剂（细胞松弛素D、细胞松弛素B、或latrunculinA）处理都显著地抑制花粉萌发和花粉管生长,而且微丝解聚剂的抑制作用表现出对胞外Ca<2+>的依赖性,说明微丝解聚剂对花粉萌发和花粉管生长的抑制可能是通过影响胞外Ca<2+>内流起作用的.利用激光共聚焦显微术对花粉原生质体或花粉管胞质自由Ca<2+>水平的观测结果证明,微丝解聚剂处理引起胞质自由Ca<2+>水平的显著增高,而Ca<2+>通道抑制剂或微丝稳定剂却能抑制微丝解聚剂的作用.运用膜片钳单通道记录方法对花粉原生质体质膜Ca<2+>电流信号的观测及分析结果表明,拟南芥花粉质膜上存在一种电导为7.0pS的超极化激活的内向Ca<2+>通透性通道,微丝解聚剂处理可引起该通道开放几率的显著增加,而微丝稳定剂却能阻断微丝解聚剂激活Ca<2+>通道的作用.在生长中的花粉管顶端区域存在的微丝解聚/聚合动态变化很可能是控制该区域Ca<2+>振荡的内在机制.
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