研究目的肝脏是糖脂代谢的中心器官,且具有强大的再生能力,促进肝脏再生对加快术后肝功能恢复及降低术后死亡率具有重要临床意义。肝切术后肝脏出现一过性脂肪变性,但这一现象在肝再生中的作用和发生的具体机制仍所知甚少并存在争议。因而,明确肝脏再生过程中肝细胞如何协调细胞增殖与脂代谢功能之间的关系具有重要临床转化价值。ACOT家族通过分解硫酯键释放游离脂肪酸和辅酶A（CoA-SH）,与肝脏脂肪酸代谢密切相关,但ACOTs在肝再生中的作用尚未被研究。通过对ACOT家族的研究,以期加深对脂肪酸β氧化与肝再生关系的理解,并筛选能够反映或改善肝切术后脂肪酸代谢水平和肝再生能力的靶标。研究方法对于临床肝切术后肝再生,我们使用人血清蛋白质组学技术联合肝脏三维成像及磁共振脂质定量技术,探究肝再生早期一过性脂质堆积和脂肪酸β氧化情况。另外,我们使用广泛靶向定量脂质组技术对2/3肝切术前和术后的小鼠肝脏进行脂质成份检测,分析术后肝再生早期的脂质成份组成及含量变化。通过荧光定量PCR、免疫印迹以及腺相关病毒（AAV8-shAcot2）实验探究Acot2在一过性脂肪变性过程中的变化和作用。构建转录因子过表达质粒以及双荧光素酶报告实验检测Acot2在转录层面的调控。通过CRISPR技术构建Mett114条件性敲除鼠,进行RNA甲基化测序（MeRIP-seq）和蛋白质组检测,结果联合分析m6A修饰对Acot2转录后水平的影响。并通过慢病毒感染实验、RNA稳定性检测实验和RNA免疫沉淀（RIP）技术明确Acot2 mRNA m6A修饰潜在的writer与reader蛋白。研究结果由于无法获取临床肝切术后再生组织,我们通过磁共振脂质定量分析技术检测了肝脏脂质情况,结果显示临床肝切患者同肝切再生动物模型一样均存在肝再生过程中的一过性脂肪堆积现象。基于临床血清蛋白质组学发现肝再生早期脂肪变性过程中脂肪酸β氧化水平显著增强,再生模型的肝再生组织脂质组分析显示,脂质成份与术前差异明显,主要表现为脂酰肉碱（CAR）含量的显著增加以及辅酶Q（CoQ）的显著减少。进一步筛选到与脂肪酸β氧化密切相关的Acot2,其表达变化与肝切术后肝细胞一过性脂肪变性趋势相一致。Acot2隶属于ACOT家族,主要负责平衡游离脂肪酸、脂酰辅酶A和CoA-SH含量,我们对AAV感染的小鼠进行PHx肝切造模,结果显示敲低Acot2可造成术后肝细胞中的脂质堆积延时,并延缓肝细胞的增殖峰期,促进肝功能损伤指标ALT和AST的显著增高。肝切术后Acot2的表达不仅受到转录因子PPARα在转录水平的调控,还受到m6A-RNA甲基化修饰参与的转录后的机制调控。RIP实验进一步证实m6A-RNA甲基化修饰writer蛋白Mettl14和reader蛋白Ythdf2参与了对Acot2的转录后调控。研究结论我们首次证实临床肝切患者肝再生过程中存在一过性脂肪变性现象,且肝再生早期脂肪酸β氧化水平显著增强。Acot2表达变化与肝切术后一过性脂肪变性趋势相一致,敲低后可延长肝细胞的脂肪变性时间,延缓肝细胞的增殖峰期,进而加重肝功能损伤。肝切术后Acot2同时受到PPARα的转录激活和m6A-RNA甲基化修饰参与的转录后调控。Acot2可反映术后肝再生脂肪酸β氧化水平的高低,在肝切术后表达增高对肝再生具有一定的保护性作用,Acot2或可作为潜在的预警术后肝功能损伤程度和肝再生能力的标志物及促进术后肝再生的治疗靶点。