伏马菌素(fumonisins)是一组主要由串珠镰刀杆菌在产生的真菌毒素,其广泛存在于粮食与饲料中,尤其是玉米、小麦及其一些农副产品污染较为严重,对人畜的健康造成较大的威胁。目前,已发现有15种伏马菌素,其中FB1、FB2和FB3是自然界中产生的主要毒素,而FB1被认定是污染玉米及其制品的主要组分,也是伏马菌素毒性产生的主要原因。FB1具有神经毒性、细胞毒性、免疫毒性、肝肾毒性以及致癌性等,被国际癌症研究中心(IARC)划分为2B类致癌物。大量研究发现,FB1与人类食道癌的发生有着密切的联系,但未有直接证据证明。当前,针对FB1的检测方法主要有高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、液相色谱-质谱联用法(LC-MS)以及酶联免疫吸附法(ELISA)等。由于色谱法对仪器要求较高,费用昂贵,且需要专业人员进行操作,限制了仪器的推广应用,而ELISA具有特异性高、灵敏度好,简单快速等优点得到了较为广泛的应用,受到众多专家的青睐。本研究主要是在FB1完全抗原及其单克隆抗体的基础上,建立一种Ci-ELISA方法,并进行了玉米样品的临床检测。本试验首先采用了戊二醛一步法对半抗原FB1与载体蛋白OVA进行偶联,制备完全抗原,分别采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)、紫外扫描法(UV)和质谱法(MS)等对FB1与OVA的偶联效果进行鉴定,结果显示偶联成功。经焉滞法检测得FB1-OVA和OVA的相对分子量分别是51928.612和44265.718,计算FB1与OVA的偶联比为10.6：1。将杂交瘤细胞进行扩大培养,注射入小鼠腹腔,收集腹水并进行纯化,获得FB1单克隆抗体,经过间接ELISA方法的检测,可得单抗的效价为1：1×105,浓度为2.56 mg/mL,杂交瘤细胞所分泌的抗体亚型为IgG1,经多次传代与冻存后,仍可稳定分泌抗体。在FB1单克隆抗体基础上,经过试验条件的优化,建立了Ci- ELISA检测方法,绘制标准曲线为y=-38.524x+98.816,相关系数R2=0.9961,该方法测定线性范围2.5～250 ng/mL,灵敏度(IC50)为12 ng/mL,最低检出限为2.28 ng/mL,批内变异系数为2.35%,批间变异系数为1.96%。检测玉米加标回收率,批内回收率范围102±4%一90.5±3.2%,批间回收率范围96.3±7.6%一86.7±5%,平均批内变异系数为3.84%,平均批间变异系数为6.22%。与FB2的交叉反应率为60.4%,与脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON),黄曲霉毒素B1 (AFB1),赭曲霉毒素A(OTA)交叉反应率均小于1%。本试验运用建立的FB1 Ci-ELISA方法对安徽省阜阳市、毫州市、合肥市、蚌埠市、安庆市和淮北市等六个地区144份玉米样品进行了临床检测,结果显示,蚌埠市FB1阳性污染率最低,为20.8%,污染含量介于0.062-0.237μg/kg之间,平均污染水平为0.074 μg/kg；阜阳市FB1阳性污染率最高,达到95.8%,污染含量在0.52-1.37 μg/kg,平均污染水平为0.883μg/kg。通过FB1 Ci-ELISA方法的建立,为安徽省食品安全地方标准的制定奠定了基础,同时对加强食品安全的监管以及为畜禽的健康饮食提供安全可靠的技术保障。