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目的:观察扁蒴藤素对人鼻咽癌细胞增殖的抑制作用,并对其诱导肿瘤细胞凋亡的可能机制进行研究。方法:(1)四甲基偶氮唑蓝(MTT)法分别检测扁蒴藤素对人鼻咽癌HNE-2、CNE-2、HONE-1细胞的增殖抑制作用;(2)使用流式细胞仪考察扁蒴藤素对HNE-2细胞凋亡的影响;(3)MTT法检测caspase抑制剂对扁蒴藤素抑制HNE-2细胞增殖能力的影响;(4)免疫印迹分析法检测扁蒴藤素对Caspase3、Caspase9、PARP的蛋白切割片段含量,Bcl-2家族蛋白,内质网应激信号通路相关蛋白,HSP90客户蛋白表达的影响;(5)免疫共沉淀法检测扁蒴藤素对HSP90与其辅伴侣CDC37之间相互作用的影响;(6)MTT法检测扁蒴藤素对5-氟尿嘧啶抑制鼻咽癌细胞增殖作用的影响;(7)免疫印迹分析法检测扁蒴藤素单用以及联合5-氟尿嘧啶对HNE-2细胞中胸腺嘧啶合成酶(TS)蛋白量的影响(8)免疫共沉淀法探索扁蒴藤素降低TS的可能机制。结果:(1)扁蒴藤素呈浓度依赖性地抑制人鼻咽癌HNE-2、CNE-2、HONE-1细胞的增殖;(2)扁蒴藤素诱导HNE-2细胞发生Caspase依赖性凋亡,且呈现出浓度依赖性;(3)扁蒴藤素能够通过对Bcl-2家族蛋白中Bim等促凋亡蛋白表达的上调、Bcl-x L等促生存蛋白的下调,刺激内质网应激信号通路相关蛋白如bip、PEAK等的表达,诱导细胞凋亡。(4)扁蒴藤素可引起HSP90的客户蛋白,如EGFR、C-MET等的含量,呈现浓度依赖性下调趋势;同时还能抑制HSP90与其辅伴侣CDC37之间的相互作用。(5)扁蒴藤素协同增强5-氟尿嘧啶对HNE-2细胞的增殖抑制作用;(6)扁蒴藤素单用时具有浓度依赖性降低TS含量的作用,与5-氟尿嘧啶联用则能协同降低TS含量;(7)扁蒴藤素能够明显抑制HSP90与TS的相互作用。结论:扁蒴藤素对鼻咽癌细胞具有增殖抑制及诱导凋亡的作用。其诱导鼻咽癌细胞凋亡与其激活了内源性凋亡通路以及内质网应激通路密切相关。作为新型的HSP90抑制剂,可干扰HSP90与其辅伴侣CDC37之间的相互作用,导致相关客户蛋白因失去HSP90的保护而被降解,诱导细胞凋亡。此外扁蒴藤素能够抑制HSP90与TS之间的相互作用,降低TS蛋白量,增强5-氟尿嘧啶对HNE-2细胞的增殖抑制作用。这些结果为今后以扁蒴藤素为先导化合物开发新型抗肿瘤药物提供了一定的理论基础,并为增强5-氟尿嘧啶化疗敏感性提供了新的思路。