茶轮斑病（Tea grey blight）在贵州茶区是一种发病较为严重的病害,且茶树的叶片是该病害的主要病发部位。当茶树受到病害侵染时,茶树生长受阻,叶片表面产生大量病斑,并引起叶片脱落,从而降低茶叶的产量和品质。因此,分离鉴定茶轮斑病的病原菌,筛选出抑制该病原菌的高效、安全的药剂,并研究该药剂对茶轮斑病病原菌的作用机理,为防治茶轮斑病提供重要依据。经课题组前期工作发现,茶假拟盘多毛孢菌菌株GZHS-2017-010为茶轮斑病的病原菌,因此本论文以该病原菌为研究对象,通过生长速率法测定宁南霉素药剂对茶假拟盘多毛孢菌的抑菌活性。根据结果显示,宁南霉素对茶假拟盘多毛孢菌有较好的抑菌活性,其EC₅₀值为75.92 U。基于宁南霉素对其具有较好抑菌活性,本论文还研究宁南霉素对病原菌的作用机制。本实验采用500 U的宁南霉素处理病原菌14 h,通过扫描电镜及透射电镜观察处理病原菌14 h后的菌丝形态,通过扫描电镜发现经宁南霉素处理的菌丝表面不光滑,新生菌丝分枝处变细,新生菌丝变短。采用透射电镜观察经宁南霉素处理后的菌丝发现,其菌丝内部各细胞器的边界结构不清晰,各细胞器有萎缩,出现小的空腔。随后,对500 U浓度处理1 h和14 h的病原菌采用转录组技术进行测序,分析得到,处理菌株GZHS-2017-010 1 h后,分析得到929个差异基因,其中,有615个基因上调,314个基因下调;处理菌株GZHS-2017-010 14 h后,得到1692个差异基因,其中,有865个基因上调,827个基因下调（|log₂foldchange|≥1,p<0.05）。根据GO富集分析发现,差异基因分别在膜的组成成分的分子功能、跨膜转运成分及细胞核的生物过程富集程度最高。根据转录组数据随机挑选宁南霉素1 h处理组的12个差异基因,用RT-q PCR对其进行验证,结果表明,转录组的测序结果与验证的12个差异基因表达水平基本一致;并且对宁南霉素涉及的通路中的差异基因进行表达水平分析,并发现DIS3、MCM3、RRP45、LSM3、MNN9、NMT1、RPB7、PIL1、RPN8和CDC3基因在经宁南霉素处理假拟盘多毛孢病原菌三个时间点（1 h、7 h、14 h）和3个同浓度(EC₃₀,EC₅₀,EC₇₀)后,其结果显示在3个不同浓度(EC₃₀/EC₅₀/EC₇₀)处理1 h/7 h/14 h后,所有的基因表达水平均呈显著下调趋势。基于以上研究结果,我们初步认为宁南霉素可能影响茶假拟盘多毛孢菌菌株GZHS-2017-010中的RNA降解、多类N-聚糖生物合成和剪接体等通路。