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【研究背景和目的】阿尔茨海默病(AD)又称作老年性痴呆,是一种缓慢进展的中枢神经系统退行性疾病,其病理改变包括:细胞外β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积(即老年斑)、细胞内神经原纤维缠结和神经元缺失。大量研究表明,过量生成的Aβ及其所导致的代谢异常、氧化应激、炎性反应、突触可塑性损害及细胞凋亡等损害,是导致AD病变发生和发展的重要病理学基础。蛋白激酶C-δ(PKCδ)是一种调控细胞内信号转导的重要蛋白激酶,参与介导能量代谢、氧化应激、细胞凋亡等过程。以往的研究提示PKCδ可能参与了AD病程中Aβ生成的调控,但对其确切的效应作用及相关机制迄今仍未阐明。因此,针对PKCδ在Aβ生成及其所致AD病理损害中效应作用及相关机制的深入研究,必将有助于进一步阐明AD病变的发生及发展过程,为开发AD药物提供新的思路和作用靶点。【研究方法】使用PKCδ特异性抑制剂Rottlerin,以6月龄APPswe/PS1d E9(APP/PS1)雄性转基因AD小鼠和同龄野生型(WT)C57BL/6雄性小鼠为研究对象,随机为WT+赋形剂治疗组、WT+Rottlerin治疗组、APP/PS1+赋形剂治疗组和APP/PS1+Rottlerin治疗组。分别给予腹腔注射PKCδ特异性抑制剂Rottlerin或赋形剂,共治疗12周。通过行为学、免疫组织化学、荧光染色、ELISA、PCR和Western blot等实验方法,深入探讨抑制PKCδ对于阻断AD病程中Aβ生成的效应作用及其相关机制。【研究结果】我们的研究发现:(1)使用Rottlerin特异性抑制PKCδ可以显著改善转基因AD小鼠空间学习记忆功能损害;(2)使用Rottlerin特异性抑制PKCδ可以显著提高转基因AD小鼠脑内突触相关蛋白PSD-95和SYP的含量;(3)使用Rottlerin特异性抑制PKCδ可以显著减少转基因AD小鼠脑内Aβ生成及斑块沉积;(4)使用Rottlerin特异性抑制PKCδ可以显著减少转基因AD小鼠脑内APP淀粉样蛋白代谢通路中关键限速酶BACE1的转录与表达;(5)使用Rottlerin特异性抑制PKCδ并不影响转基因AD小鼠脑内APP非淀粉样蛋白代谢通路中相关酶(ADAM10和PS1)及Aβ降解酶(IDE和NEP)的表达;(6)使用Rottlerin特异性抑制PKCδ可以通过减少转基因AD小鼠脑内NF-κB通路中IκBα和转录因子p65磷酸化,进而降低BACE1的转录与表达。【研究结论】使用Rottlerin特异性抑制PKCδ可以通过减少转基因AD小鼠脑内NF-κB通路中IκBα和转录因子p65磷酸化,降低BACE1的转录与表达,阻断APP淀粉样蛋白代谢通路,进而显著抑制转基因AD小鼠脑内Aβ生成及斑块沉积,改善空间学习记忆功能损害。表明PKCδ在调控Aβ生成中发挥着重要作用,以Rottlerin特异性抑制PKCδ为靶点具有潜在的AD治疗作用。