目的 脊髓损伤（Spinal cord injury,SCI）是一种常见的能导致终生严重残疾的灾难性创伤,研究SCI的治疗已成为全球共同关注的重大医学课题。骨髓基质干细胞（Bone marrow stromal stem cells,BMSCs）具有免疫调节和神经营养作用。实验证明BMSCs移植治疗SCI能有效促进神经功能恢复。但目前存在着移植后BMSCs的存活率和向神经细胞的分化率较低等问题。而Bcl-2抗凋亡蛋白不仅能抑制细胞凋亡,还参与神经分化的调控,并在轴突生长和再生中起关键作用。本研究旨在探究Bcl-2蛋白对BMSCs存活和移植的影响。方法 本课题主要涉及体外和体内两个方面。体外实验中,从大鼠中提取原代BMSCs,传代扩增后用流式细胞计数进行鉴定。利用专用诱导培养基培养,验证BMSCs的多向分化能力;用慢病毒感染的方法构建过表达Bcl-2的BMSCs细胞模型,分为过表达Bcl-2的Bcl-2-BMSCs组、转染空载体的Vector-BMSCs组,以及未转染的BMSCs组,利用WB检测各组中Bcl-2和h Bcl-2的蛋白表达情况,确认转染成功,用CCK-8检测细胞活性以及血清剥夺条件下的存活情况;用M1型巨噬细胞条件培养基（Conditioned medium,CM）培养过表达Bcl-2的BMSCs,用细胞免疫荧光（Immunocytochemistry,ICC）检测凋亡蛋白Cleaved Cleaved Caspase 3的表达情况。体内实验中,构建SCI大鼠钳夹模型,将过表达Bcl-2的BMSCs在SCI 3天后移植到受损脊髓组织,同时使用转染空白病毒转染的BMSCs、PBS和假手术大鼠作为对照组,连续4周利用BBB评分评估SCI大鼠运动功能恢复情况;利用苏木精-伊红（Hematoxylin and eosin,HE）染色评估SCI损伤14天后大鼠脊髓组织的恢复情况。结果 流式细胞鉴定结果显示本实验提取培养的细胞为BMSCs。在专用诱导分化培养基的持续诱导下,BMSCs可以向成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞等多个方向分化。Bcl-2-BMSCs组细胞中Bcl-2的表达量明显高于另外两组,且h Bcl-2几乎只在该组表达。与空载体组进行对照,过表达Bcl-2提高了BMSCs的细胞活性,改善了细胞在血清剥夺条件下的存活情况,并能对抗M1型巨噬细胞的诱导细胞凋亡的作用。体内实验表明,在SCI 3天后移植过表达Bcl-2的BMSCs的SCI大鼠,SCI 14天后的组织损伤范围更加局限,BBB评分显示从移植后4天开始,BMSCs移植显著促进了SCI大鼠的运动功能恢复,并且过表达Bcl-2的BMSCs移植大鼠比单纯的BMSCs移植的恢复更好。结论 过表达Bcl-2促进了BMSCs的存活,过表达Bcl-2的BMSCs移植减轻了SCI大鼠脊髓组织的破坏,有利于SCI大鼠的功能恢复。