背景:吲哚菁绿是具有近红外荧光显影特征的示踪剂,已用于乳腺癌的前哨淋巴结活检（sentinel lymph node biopsy,SLNB）定位,原位荧光的裸眼不可见性限制了近红外荧光成像系统（Near infrared fluorescence imaging system,NIRF）在乳腺癌前哨淋巴结活检中实时导航的应用。本研究旨在介绍一种可实现术野实时荧光显影的新型近红外系统,通过和现有的近红外荧光显影系统的对比,评价其有效性和安全性,以及联合亚甲蓝（methylene blue,MB）和新型近红外系统在SLNB中的应用价值。方法:60例临床淋巴结阴性乳腺癌患者应用ICG联合MB定位前哨淋巴结。利用中国科学技术大学设计的直视下淋巴荧光成像系统（直视成像仪）和廊坊明德医学生物技术有限公司的血管成像仪（明德成像仪）两种近红外系统仪器作为导航辅助定位前哨淋巴结（Sentinel lymph nodes,SLNs）。两种荧光成像仪均荧光显影的淋巴结、MB染色的蓝染淋巴结及触诊可疑阳性的淋巴结均切除,这些淋巴结均视为SLNs送检快速冰冻病理活检。结果:两种仪器实时体表淋巴管荧光成像成功率均为95%（57/60）。直视下成像仪ICG联合MB共定位186个SLNs,其中2个经病理证实无任何淋巴结组织。MB联合直视下成像仪ICG的SLN检出率为100%（184/184）,单独MB作为示踪剂的SLN检出率为86.96%（160/184）。直视下荧光成像联合MB检测到的SLNs中位数为3（1-8）,显著高于单独MB示踪到的SLNs中位数为2（1-7）（P<0.05）。单独明德成像仪的识别SLNs中位数为3（1-8）,和单独的直视下荧光检出个数相比差异无统计学意义。结论:直视下荧光成像仪能有效示踪前哨淋巴结,在手术过程中原位投射荧光信号,提供了一种无需转换视野的连续手术导航系统,其相对于明德系统在检出率和安全性上无明显差异。直视下荧光成像仪导航联合MB示踪的高检出率则提示这种方法可能会成为一种新的替代核素的双示踪剂法。