背景弥漫大B细胞淋巴瘤（Diffuse Large B Cell Lymphoma,DLBCL）作为非霍奇金淋巴瘤疾病中最为常见的类型之一,具有异质性高、侵袭力强、预后不佳等特点。目前,深入探究DLBCL的发病机制、找寻具备治疗潜力的新型靶标具有重要的临床现实意义。KRAB锌指蛋白（Krüppel-associated box domain-zinc finger protein,KRAB-ZFPs）——机体中分布最广泛的转录因子家族,其成员之一是位于19p13.12的ZNF382。已有研究证实,ZNF382在多种实体肿瘤中由于启动子区Cp G岛发生高频甲基化而失活。但目前尚无关于ZNF382在DLBCL中的表达情况及与患者预后的相关性研究。因此,本研究从ZNF382在DLBCL中的表达和甲基化情况入手,进一步探究DLBCL中ZNF382的表观遗传学改变和生物学功能。目的检测DLBCL组织及细胞株中ZNF382的表达差异,分析其与DLBCL患者的临床病理特征、治疗应答率及预后的相关性;同时应用去甲基化药物地西他滨（DAC）处理DLBCL细胞株,检测药物处理过后的ZNF382表达水平及启动子区甲基化状态;并进一步构建ZNF382过表达细胞株,探讨过表达ZNF382对DLBCL细胞株生物学功能的影响。方法1.采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测DLBCL细胞株OCI-LY10、U2932中ZNF382的m RNA表达水平;收集确诊为DLBCL患者的病理性淋巴结组织,以反应性增生的淋巴结组织为对照,采用免疫组化（IHC）法检测ZNF382的蛋白表达差异,并探讨不同DLBCL患者ZNF382表达差异与临床特征、治疗效果及预后之间的相关性。2.通过甲基化特异性PCR（MSP）检测DLBCL细胞株中ZNF382的甲基化状态;随后对上述细胞株进行DAC干预处理72h,通过MSP和RT-PCR检测ZNF382启动子区域甲基化程度及其表达状态的改变。3.采用慢病毒包装系统转染人胚肾细胞293T,制备过表达ZNF382的慢病毒颗粒;随后将其感染DLBCL细胞株,使用嘌呤霉素筛选2周后,流式细胞术检测其纯度;应用CCK-8法、Transwell迁移实验以及克隆形成实验分析过表达ZNF382对DLBCL细胞株生物学功能的影响。结果1.与对照组相比,DLBCL患者病理组织中的ZNF382蛋白表达存在明显下调（P<0.05）;ZNF382高表达组2年无事件生存（EFS）率高于低表达组（59.4%对18.3%,χ2=17.955,P<0.001）;ZNF382在DLBCL细胞株OCI-LY10和U2932中的m RNA表达水平也存在不同程度的沉默或下调（P<0.05）。2.DLBCL细胞株中ZNF382基因启动子区的甲基化水平较对照淋巴结组织明显升高;在用去甲基化药物DAC处理72h后,ZNF382基因启动子区甲基化水平较前下降,m RNA表达水平得以部分恢复（P<0.05）。3.制备过表达ZNF382的慢病毒颗粒,随后感染OCI-LY10和U2932细胞。结果显示,过表达ZNF382可显著抑制DLBCL细胞株的增殖、迁移和集落形成能力（P<0.05）。结论本研究结果表明,ZNF382在DLBCL中的表达水平降低、启动子区甲基化频率增加,且ZNF382表达水平与DLBCL患者疾病预后呈正相关;去甲基化药物DAC可降低DLBCL细胞株中ZNF382启动子区甲基化水平并部分恢复ZNF382表达;ZNF382可在DLBCL细胞株中发挥抑制细胞增殖、迁移和克隆形成的生物学功能。综上所述,ZNF382在DLBCL中可能发挥抑癌基因的作用,本课题有望通过未来更深一步的研究为DLBCL的靶向、精准治疗提供一定的实验室基础和理论依据。