早在90年代已发现NO可以诱导植物细胞死亡。然而,NO诱导细胞死亡的分子机理至今仍然未被揭示。亚硝基谷胱甘肽还原酶(S-nitrosoglutathione reductase, GSNOR1)是调控细胞内亚硝基化稳态平衡的关键酶。我们在沉默GSNOR1的番茄、烟草和本氏烟叶片上分别观察到显著的自发性细胞死亡；另外,TMV侵染可导致本氏烟GSNOR1沉默株系发生系统死亡,说明植物GSNOR1是细胞死亡的负调控因子。由于GSNOR1沉默株系中蛋白亚硝基化水平升高,我们推测GSNOR1沉默株系中的自发性细胞死亡可能是通过亚硝基化细胞死亡信号途径中一个关键的负调控因子所导致。在文献检索的基础上,我们将目标瞄定于PDK1-PKB/Akt/Adi3信号途径。该途径在酵母、小鼠和番茄的细胞死亡中起负调控作用,且小鼠Akt/PBK是亚硝基化的靶蛋白,其激酶活性被亚硝基化修饰所抑制。为了鉴定番茄中Akt/PBK同源蛋白Adi3是否同样被亚硝基化,我们对在细菌中表达、纯化的番茄Adi3及PDK1进行了生物素置换法分析。出乎我们意料的是,Adi3不能被亚硝基化修饰,而PDK1 (Adi3上游的AGC激酶)却能被亚硝基化修饰；且在体外条件下GSNO以浓度梯度方式抑制PDK1激酶活性；H202对该抑制具共促效应(synergistic effect),而还原剂DTT则可部分去除GSNO对PDK1激酶活性的抑制。为了鉴定PDK1亚硝基化的靶半胱氨酸(Cys)位点,我们运用体外突变技术创制了4种不同Cys→Ser突变体。我们将用生物素置换法鉴定出PDK1中被亚硝基化修饰的Cys靶位点。综上所述,我们的研究结果将为建立PDKl与NO诱导的细胞死亡间潜在的联系奠定基础。