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目的： Sequirin C属于具有多种药理活性的木质素家族成员，即天然酚类化合物，同时也是植物类雌激素。有研究报道Sequirin C具有抗白血病作用，但是作用机制和靶点不明确。本研究旨在探索Sequirin C对HL60细胞增殖及凋亡的影响，进一步探索其机制及明确潜在靶蛋白，同时为进一步作用于动物及进入临床研究提供必要的实验和理论依据。 方法： 1. CCK-8实验方法检测Sequirin C筛查多种肿瘤细胞其毒性作用及对正常肝肾细胞的细胞毒性作用。 2.软琼脂实验检测不同浓度Sequirin C对HL60细胞增殖及集落形成能力的影响。 3.流式细胞术用来检测Sequirin C对HL60细胞周期阻滞效果和诱导凋亡情况。 4.计算机根据晶体结构模拟技术筛选出Sequirin C潜在的靶蛋白。 5.抗体芯片技术进一步检测Sequirin C作用于HL60细胞株的相关通路及可能靶标。 6. Western blot实验检测Sequirin C对增殖及凋亡通路相关蛋白的影响。 7. Pull-down实验用来验证Sequirin C与潜在靶蛋白直接结合情况。 结果： 1. CCK-8实验结果证实Sequirin C对多种肿瘤细胞具有一定的细胞毒性，但是对HL60细胞株作用最明显，并呈时间-浓度依赖性；对正常肝肾细胞不仅没有细胞毒性，并且随着作用时间的延长和浓度的增加HL60细胞呈增殖趋势。 2.软琼脂实验结果提示Sequirin C可以抑制HL60细胞增殖及减少集落形成。 3.流式细胞术检测结果提示Sequirin C对凋亡作用明显且对周期阻滞作用不明显。 4.计算机模拟技术筛选出的潜在靶蛋白可能与MAPK通路相关。 5.抗体芯片技术结果更进一步验证其相关通路及潜在的靶蛋白：ERK1/2、JNK、p38、AKT、GSK3β、Stat1和Stat3等。 6. Western blot实验结果明确细胞相关通路，即Sequirin C可抑制MAPK信号通路中磷酸化的ERK1/2及JNK以及下游信号通路包括RSK2，MSK1，和 CREB磷酸化水平的表达；同时检测了线粒体凋亡途径，即 Cleaved Caspase-3，-7，-9，p-Bad和Cleaved PARP的蛋白表达水平随着药物浓度的增加而明显增高，Bcl-2蛋白表达水平则明显降低。 7. Pull-down实验结果提示Sequirin C可与ERK1/2及JNK直接结合，同时也证实了Sequirin C是一个多靶标的天然产物。 结论： 目前的实验结果证实了ERK1/2和JNK可能均是Sequirin C的潜在靶蛋白，即天然产物Sequirin C可能是一个多靶标的抑制剂。同时，Sequirin C可作为治疗急性髓系白血病临床候选药物有待进一步研究。