TGF-β1通过IL-11调控宫腔粘连子宫内膜纤维化的机制研究

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:ashwgs
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宫腔粘连(intrauterine adhesion,IUA),即Asherman综合征,是人工流产等宫腔手术操作后发生的常见疾病。宫腔粘连的病理学特征是纤维化,但目前发病机制尚不完全清楚。转化生长因子β-1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)是导致多器官纤维化的重要细胞因子,但其在人体中的作用广泛的,若直接将TGF-β1作为减轻器官纤维化的位点,将可能引起广泛的副反应。因此研究TGF-β1促进纤维化作用的下游信号通路,将有助于发现新的更具特异性的抑制纤维化作用靶点。近期研究发现IL-11在心脏、肺脏、肾脏等多器官纤维化中发挥重要作用,并且指出TGF-β1可以使IL-11的转录水平增加,从而导致器官纤维化,但关于TGF-β1/IL-11信号通路在宫腔粘连中发挥的作用及其机制未见相关报道。本文拟通过对IUA患者进行初步研究,探索TGF-β1与IL-11在宫腔粘连中的相关性。同时建立IUA小鼠模型,观察IL-11与IUA动物模型是否具有较好的关联性,再次验证TGF-β1与IL-11在宫腔粘连中的相关性。最后进行人原代子宫内膜成纤维细胞培养,在细胞水平初步探索TGF-β1通过IL-11调控宫腔粘连子宫内膜纤维化的可能机制,尽可能为临床治疗宫腔粘连提供新的技术手段。第一部分IL-11与宫腔粘连子宫内膜纤维化的相关性研究目的:探索IL-11和宫腔粘连子宫内膜纤维化的相关性及IL-11是否可能参与了宫腔粘连的发病过程。方法:选择重医附二院妇科经宫腔镜检查确诊的宫腔粘连患者及正常患者,分为宫腔粘连组及对照组。两组分别取部分子宫内膜组织,运用Western Blot、免疫组化技术检测两组子宫内膜中TGF-β1、IL-11、CollagenⅠ、CollagenⅢ、α-SMA的蛋白表达水平,并通过Masson染色计算IUA组和对照组的纤维化面积。结果:宫腔粘连组子宫内膜纤维化相关蛋白TGF-β1、IL-11、CollagenⅠ、CollagenⅢ、α-SMA的表达较对照组明显升高,子宫内膜纤维化程度也较对照组增加。结论:IL-11可能参与了IUA的发生。第二部分IL-11与宫腔粘连动物模型子宫内膜纤维化的相关性研究目的:观察动物模型与疾病的发生是否具有较好的关联性,再次验证TGF-β1与IL-11在宫腔粘连中的相关性。方法:将8只成年雌性未生育的KM小鼠随机分入假手术组和宫腔粘连组,对照组仅进行开关腹操作,宫腔粘连组除开关腹外同时进行宫腔机械搔刮损伤子宫内膜。运用Western Blot、免疫组化技术检测对照组和宫腔粘连组子宫内膜TGF-β1、IL-11、CollagenⅠ、CollagenⅢ、α-SMA的蛋白表达水平,并通过Masson染色计算IUA组和对照组的纤维化面积。结果:宫腔粘连组子宫内膜纤维化相关蛋白TGF-β1、IL-11、CollagenⅠ、CollagenⅢ、α-SMA的表达相比对照组明显升高,宫腔粘连组的纤维化程度明显高于对照组。结论:成功建立IUA小鼠模型,且该模型与宫腔粘连发病有着良好的关联性性。IUA小鼠模型中TGF-β1、IL-11的表达水平相较于对照组明显增加,与人体标本结果一致。第三部分TGF-β1通过IL-11调控人子宫内膜细胞纤维化的作用及机制目的:体外研究TGF-β1通过IL-11调控人子宫内膜细胞发生纤维化的作用,初步探索潜在的机制。方法:原代培养人子宫内膜成纤维细胞后,分为对照组、TGF-β1组、IL-11组、TGF-β1+IL-11中和抗体组共四组,运用WB对CollagenⅠ、α-SMA蛋白在子宫内膜的表达进行半定量检测。结果:TGF-β1组、IL-11组的纤维化相关蛋白表达相较于对照组升高,TGF-β1+IL-11中和抗体组的纤维化相关蛋白表达相较于TGF-β1组、IL-11组减少。结论:TGF-β1可能通过促进IL-11的表达,诱导人子宫内膜细胞纤维化,IL-11可能是治疗子宫内膜纤维化新的靶点。
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